[发明专利]一种转铁蛋白受体靶向多肽类似物－阿霉素偶联物、其制备方法与用途

权利要求书

1.一种治疗肝癌的转铁蛋白受体靶向多肽类似物-阿霉素偶联物，其特征在于，所述转铁蛋白受体靶向多肽类似物-阿霉素偶联物具有如下所示的结构：

BP9a-SS-DOX

其中，BP9a为转铁蛋白受体靶向多肽类似物，其肽序列为NH₂-Cys¹-Ala²-His³-Leu⁴-His⁵-Asn⁶-Arg⁷-Ser⁸-OH；DOX为抗肿瘤药物阿霉素；-SS-表示含二硫键的连接臂，所述连接臂具有下式所示的结构：

所述转铁蛋白受体靶向多肽类似物-阿霉素偶联物的制备方法为：

(1)制备BP9a

采用固相多肽合成法，在N,N-二异丙基乙胺存在的条件下由9-芴甲氧羰基保护氨基的丝氨酸和取代度为0.6～1.3mmol/g的2-CTC树脂反应得到Fmoc-Ser(tBu)-CTC树脂，其中2-CTC树脂与N,N-二异丙基乙胺与9-芴甲氧羰基保护氨基的丝氨酸的摩尔比为1:2～6:2～6；所得Fmoc-Ser(tBu)-CTC树脂经过体积浓度为20％～40％的哌啶/N,N-二甲基甲酰胺溶液除去Fmoc保护基团后，以N,N'-二异丙基碳二亚胺/1-羟基苯并三唑为缩合试剂，按照肽序列从C端向N端逐步偶联氨基酸得到全保护肽树脂，其中Fmoc-Ser(tBu)-CTC树脂、所述缩合试剂和Fmoc-氨基酸的摩尔比为1:2～6/2～6:2～6，偶联时间为1～3h；按照质量体积比为1g:5～10mL的比例向所述全保护肽树脂中加入体积比为94/2.5/2.5/1的三氟乙酸/1,2-乙二硫醇/H₂O/三异丙基硅烷的裂解液切肽并脱除侧链保护基团，室温反应1～3h后将体系减压浓缩，然后用8～10倍于反应浓缩液体积的冰乙醚沉降、洗涤，所得固体用反相高效液相色谱纯化、冷冻干燥后得到BP9a纯品；

(2)制备阿霉素衍生物

将阿霉素盐酸盐、3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯和三乙胺用无水N,N-二甲基亚砜溶解，其中阿霉素盐酸盐、3-(2-吡啶二巯基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯和三乙胺的摩尔比为1:1.0～1.5:1.5～2.5，60～80℃搅拌反应5～7h，以体积比为10～15:1的二氯甲烷/甲醇体系为展开剂通过薄层层析法监控反应进程，反应完毕后用硅胶柱层析法分离纯化阿霉素衍生物DOX-SS-Pyr，所用流动相为体积比为15～25:1的二氯甲烷/甲醇体系；

(3)BP9a与阿霉素衍生物的偶联

将步骤(1)得到的BP9a与步骤(2)得到的阿霉素衍生物用N,N-二甲基甲酰胺溶解，其中BP9a和阿霉素衍生物的摩尔比为1:1.0～3.0；N₂保护下室温搅拌反应12～18h，反应完毕后用8～10倍于反应液体积的冰乙醚沉降、洗涤，所得固体用反相高效液相色谱纯化、冷冻干燥后得到所述BP9a-SS-DOX偶联物。

2.根据权利要求1所述的转铁蛋白受体靶向多肽类似物-阿霉素偶联物在制备用于预防或治疗肝癌的药物中的用途。