[发明专利]一种运载亚铁离子的荧光纳米粒子的制备方法及其在制备纳米亚铁离子复合物中的应用

说明书

本发明公开了一种运载亚铁离子的荧光纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：使用乙醇对烤牛肉进行超声浸提，得粗提物溶液；采用有机溶剂对所述粗提物溶液萃取脱脂，收集水相；使用G25葡聚糖凝胶柱对所述水相进行纯化，收集365nm激发下产生荧光的洗脱液，旋蒸得浓缩液；使用ODS‑BP色谱柱纯化所述浓缩液，收集荧光部分，冻干获得荧光纳米粒子。本发明制备的荧光纳米粒子能够与铁结合，将所述荧光纳米粒子与亚铁离子在醋酸钠缓冲溶液混合，30～90℃加热30min，取分子量大于3000Da的溶液冻干，得纳米亚铁离子载体复合物。本发明取材容易价格低廉，容易制取，所述纳米亚铁离子载体复合物稳定性高，具有可示踪性，跨膜性。

技术领域

本发明涉及碳纳米材料的制备方法，尤其涉及一种运载亚铁离子的荧光纳米粒子的制备方法及其在制备纳米亚铁离子复合物中的应用。

背景技术

铁是一种重要的矿物元素，无论从数量上还是重要性上来讲也是最重要的微量元素之一，并且对机体的功能活动起着重要的调节作用。缺铁是人类最普遍的微量营养素缺乏症，影响了10％～20％的世界人口。在大多数情况下，妇女在怀孕期间容易患缺铁性贫血，导致胎儿生长缓慢；长期缺铁可导致脑神经系统发育异常，对免疫系统有长期影响；严重缺铁也可导致青春期生长缓慢。通常解决此问题的理想方法是在饮食中加入多种富含铁的食物，并增加饮食中的铁吸收。

常见的铁补充剂分为三类：无机铁：如硫酸亚铁，尽管铁盐含铁量高，但容易与硫化物、多酚等化合，造成食物变色、变质、脂质氧化、具有金属气味，对胃肠有严重的刺激作用。长期食用会引起恶心、呕吐、腹泻，尤其是不容易被身体完全吸收。有机铁：如葡萄糖酸亚铁，虽然有机铁剂在生物利用率方面优于无机铁剂，且相对温和、副作用小，但这类铁剂大多为亚铁盐，稳定性较差，价格也比较昂贵。多肽铁：如海参卵肽铁，但由于生产步骤多，提取纯化步骤繁琐，难以广泛应用。

发明内容

本发明的目的是提供运载亚铁离子的荧光纳米粒子的制备方法，简化传统制备方式，降低生产成本、实现过程简单、可控。

本发明为实现上述目的所采用的技术方案是：一种运载亚铁离子的荧光纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：

S1、取烤牛肉，浸泡于乙醇中，40～80Hz超声10～60min，抽滤取溶液，40～70℃旋转蒸发至所述溶液体积的1/8～1/10，去除乙醇，得粗提物溶液；

S2、使用有机溶剂，对步骤S1所述粗提物溶液萃取脱脂，收集水相；其中，所述有机溶剂为氯仿或乙酸乙酯中的一种或两种；

S3、使用G25葡聚糖凝胶柱层析对步骤S2所述水相进行纯化，所述水相的上样量和柱体积比为1:4mL/cm³，用100～250倍柱体积的去离子水洗脱，收集365nm激发下产生蓝色荧光的部分的洗脱液，40～70℃旋转蒸发浓缩至所述洗脱液原体积的1/8～1/10，得纳米粒子浓缩液；

S4、使用半制备ODS-BP色谱纯化步骤S3所述纳米粒子浓缩液，ODS-BP填料粒径为10μm，色谱柱内径为20mm，长度为300mm，流动相为体积分数5％～20％的甲醇水溶液，所述纳米粒子浓缩液的上样量为5～15mL，流速为16～20mL/min，洗脱时间为30～120min；检测器为荧光检测器，荧光光谱激发波长为320nm，发射波长为398nm，收集具有荧光的洗脱液，得到高纯度荧光纳米粒子水溶液，40～70℃旋转蒸发至所述荧光纳米粒子水溶液原体积的1/8～1/10，冷冻干燥，得到的粉末状物质即为运载亚铁离子的荧光纳米粒子。

优选方式下，步骤S1所述烤牛肉的制备方法为：取牛肉，绞碎成肉馅，置于200～280℃烤制10～50min，得烤牛肉；所述旋转蒸发的转速为70rpm～90rpm；所述烤牛肉和乙醇的重量体积比为1:2g/ml。