[发明专利]一种分子印迹量子点磷光探针的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种分子印迹量子点磷光探针的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

（1）TGA-QDs的制备：制备TGA改性的Mn掺杂ZnS量子点，其制备方法为：于三颈烧瓶中加入ZnSO₄溶液和MnCl₄溶液，所述ZnSO₄溶液与MnCl₄溶液的摩尔浓度比为12.5:1，然后加入2mL的TGA，混合溶液在氮气保护下搅拌20分钟，然后向混合物中缓慢注入0.25 mmol/mL的Na₂S·9H₂O溶液，搅拌30 min后，于50℃水浴陈化2 h，形成TGA改性Mn: ZnS QDs，即TGA-QDs，将制备好的TGA-QDs重复离心，用超纯水和乙醇洗涤三次，分散于50 mL超纯水中备用；

（2）氨基功能化SiO₂纳米粒子的制备：取体积比为3:5的乙醇-超纯水溶液，加入氨水进行混合，所述氨水与乙醇的体积比为3:1，然后向其中缓慢滴加乙醇/TEOS混合溶液，混合溶液中乙醇与TEOS的体积比4:1，室温搅拌过夜后，加入APTES，搅拌反应12 h，得到氨基功能化的SiO₂纳米粒子；将其用乙醇洗涤后离心三次，分散于50 mL乙醇中备用；

（3）SiO₂-QDs的制备：取步骤（2）所得SiO₂纳米粒子溶液，加入pH = 5.2、浓度为0.1 mM的MES缓冲液，于超声波水浴中振荡10 min，然后依次滴入TGA-QDs、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，所述1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐记为EDC，其浓度为25 mg·mL^-1，所述N-羟基琥珀酰亚胺记为NHS，其浓度为25 mg·mL^-1，所述TGA-QDs、EDC、NHS三者的体积比为1.5:8:4，滴加完毕后将混合物于室温下黑暗中搅拌反应12小时，于8000 rpm重复离心10分钟，获得纯化后的SiO₂-QDs纳米粒子；将产物分散在50 mL pH=7.0、浓度为0.02 M的PBS溶液中备用；

（4）SiO₂-QDs-MIPs的合成：取步骤（3）所得SiO₂-QDs溶液5 mL分散于15 mL PBS溶液中，超声振荡10分钟，于避光条件下向其中加入50 μL APTES和12.5 mg CEX，搅拌30分钟，然后加入0.8 mL浓度为0.2 M的CTAB溶液和0.1mL浓度为0.2 M的氢氧化钠溶液，搅拌30分钟后，再向其中加入0.1 mL NH₃·H₂O和90 μL TEOS，混合溶液在黑暗下搅拌过夜，所得产物用体积比为4:1的甲醇/超纯水反复洗涤离心，直至完全去除CEX和CTAB，于262 nm下进行紫外光谱测定，获得印迹介孔结构磷光探针SiO₂-QDs-MIPs，将其分散在20 mL的超纯水中备用。

2.根据权利要求1所述的分子印迹量子点磷光探针的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述乙醇-超纯水溶液中乙醇的体积用量为30 mL，超纯水的体积用量为50 mL。

3.根据权利要求1所述的分子印迹量子点磷光探针的制备方法，其特征在于，步骤（2）中乙醇/TEOS混合溶液中乙醇的体积为20 mL，TEOS的体积为5 mL。

4.根据权利要求1所述的分子印迹量子点磷光探针的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述APTES的添加量为5 mL。

5.根据权利要求1所述的分子印迹量子点磷光探针的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述SiO₂纳米粒子溶液的体积为5 mL，MES缓冲液的体积为45 mL。

6.根据权利要求1所述的分子印迹量子点磷光探针的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述TGA-QDs溶液的体积为1.5 mL，EDC溶液的体积为8 mL、NHS溶液的体积为4 mL。