[发明专利]一种山羊支原体山羊肺炎亚种分离培养方法在审
| 申请号： | 201910833143.3 | 申请日： | 2019-09-04 |
| 公开（公告）号： | CN110551634A | 公开（公告）日： | 2019-12-10 |
| 发明（设计）人： | 陈胜利;储岳峰;郝华芳;颜新敏;袁婷;张晓亮;刘永生 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
| 主分类号： | C12N1/02 | 分类号： | C12N1/02;C12N1/20;C12R1/35 |
| 代理公司： | 11279 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 | 代理人： | 贾慧娜 |
| 地址： | 730046 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 样品液 山羊支原体山羊肺炎亚种 接种 分离培养 孵化箱 稀释 山羊支原体山羊肺炎亚种抗原 鸡胚尿囊液 病料样品 动物血清 死亡鸡胚 样品接种 血清 孵育 鸡胚 日龄 无菌 存活 保存 收获 观察 健康 | ||
1.一种山羊支原体山羊肺炎亚种分离培养方法，其特征在于：包括以下步骤：
(1)病料样品处理，得到处理好的样品液；
(2)样品接种：将处理好的样品液或用无菌的0.01M pH7.2 PBS稀释得到的稀释后的样品液接种7-8日龄健康SPF鸡胚，接种后，将SPF鸡胚置于孵化箱继续孵育，孵化箱温度37.0～37.5℃，湿度50％；
(3)收获：观察鸡胚的存活情况，将接种后死亡鸡胚置4℃保存12-24h，收集鸡胚尿囊液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述病料样品为发病死亡山羊的新鲜病料胸水或肺泡灌洗液。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述病料样品处理是将发病死亡山羊的新鲜病料胸水或肺泡灌洗液用0.45μm滤膜的无菌滤器过滤，对滤过样品液进行灭菌。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述接种为卵黄囊接种，接种量为每枚鸡胚接种0.2ml。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中，所述健康SPF鸡胚的标准为：血管清晰、鸡胚活力旺盛。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)中，将接种1-12天后死亡的鸡胚置4℃保存12-24h。
7.根据权利要求1-6任一项所述的一种山羊支原体山羊肺炎亚种分离培养方法在山羊支原体山羊肺炎亚种分离培养中的应用。
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