[发明专利]钛氧卟啉配合物-叶酸脂质体纳米颗粒的制备方法及应用

说明书

本发明公开一种钛氧卟啉配合物‑叶酸脂质体纳米颗粒的制备方法及应用，该方法包括以下步骤：1）四对甲基苯卟啉和吡啶溶解混合后，加入四氯化钛，然后在气体保护条件下加热反应，反应停止后，分离提纯，得到钛氧卟啉配合物；2）将步骤1）得到钛氧卟啉配合物溶解，然后加入大豆卵磷脂和二棕榈酰磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇‑叶酸，旋转蒸发，得到脂质膜，脂质膜中加入缓冲溶液，超声处理，超滤，得到钛氧卟啉配合物‑叶酸脂质体纳米颗粒。本发明所述的制备方法简便易行，便于操作推广，该制备方法制作出来的钛氧卟啉配合物‑叶酸脂质体纳米颗粒能作为光敏剂应用于光动力疗法抗肿瘤，该纳米颗粒对叶酸受体高表达的癌细胞具有良好的靶向性。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，特别涉及一种钛氧卟啉配合物-叶酸脂质体纳米颗粒的制备方法及应用。

背景技术

近年来，随着癌症治疗技术的不断发展，光动力疗法（Photodynamic therapy，PDT）作为较有前景的治疗方法成为研究热点。这种方法是通过光敏剂在光照下，通过与肿瘤微环境中的氧分子发生化学反应，产生单线态氧而杀伤肿瘤细胞。但是肿瘤内部由于组织交替错乱，常表现为缺氧状态，导致光敏剂不能达到很好的治疗效果。针对这一问题，以增氧为目标的研究方案不断被开发，如血红蛋白载氧体系的设计、二氧化锰及过氧化氢酶等体系的设计，均是为了改善肿瘤缺氧问题。钛氧卟啉配合物在红外或近红外光的作用下可光解水生成自由基的独特催化性质，为PDT疗法提供了新的思路。但金属配合物小分子在体内不具备选择性，此外水溶性差、生物稳定性差等缺点，成为限制金属配合物疗效发挥的屏障。因此，设计生物相容的纳米载体负载配合物分子应用于肿瘤治疗成为提高配合物小分子治疗效果的关键。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，针对上述现有技术中的不足，提供一种钛氧卟啉配合物-叶酸脂质体纳米颗粒的制备方法及应用，该制备方法简便易行，便于操作推广，该制备方法制作出来的钛氧卟啉配合物-叶酸脂质体纳米颗粒能作为光敏剂应用于光动力疗法抗肿瘤，钛氧卟啉配合物-叶酸脂质体纳米颗粒对叶酸受体高表达的癌细胞具有良好的靶向性，在光照条件下能分解水产生自由基和单线态氧以提高光动力疗法的治疗效果，此外，该纳米颗粒还具有良好的超声成像功能，实现对药物富集的可视监测。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

一种钛氧卟啉配合物-叶酸脂质体纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：

1）四对甲基苯卟啉溶解后和吡啶混合均匀，加入四氯化钛，然后在气体保护条件下加热反应，反应停止后，分离提纯，得到钛氧卟啉配合物；

2）将步骤1）得到钛氧卟啉配合物溶解，然后加入大豆卵磷脂和二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸，旋转蒸发，得到脂质膜，脂质膜中加入缓冲溶液，超声处理，超滤，得到钛氧卟啉配合物-叶酸脂质体纳米颗粒。

作为一种优选方案，步骤1）中，所述四对甲苯基卟啉的卟啉配体与四氯化钛的摩尔比为1:1～3。

作为一种优选方案，所述加热反应期间使用紫外光谱监测反应。

作为一种优选方案，所述分离提纯的方法为硅胶柱层析法或液相色谱法。

作为一种优选方案，所述分离提纯的方法为硅胶柱层析法，所述硅胶柱层析法中所使用的展开剂为氯仿和甲醇的混合液，所述氯仿和甲醇的体积比为6:1。

作为一种优选方案，步骤2）中溶解钛氧卟啉配合物的溶剂为二甲基亚砜，钛氧卟啉配合物溶液的浓度为1-10mg/mL。

作为一种优选方案，所述大豆卵磷脂和二棕榈酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-叶酸之间的质量比为10:1。

作为一种优选方案，步骤2）中超声处理包括第一次超声处理和第二次超声处理，第一次超声处理为超声水化处理，第二次超声处理为间歇式超声处理。