[发明专利]一种基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法

权利要求书

1.一种基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法，其特征在于：包括有以下步骤：

A：绘制乐果浓度与荧光强度变化量标准曲线；绘制的方法为：

A1：取多支刻度离心管，每支刻度离心管加入一种已知浓度的乐果标准液和乐果适配体，混匀后孵育，然后加入纳米银AgNPs溶液混匀孵育，最后加入碳点CDs溶液和盐离子溶液混匀，即可制备得到待测样液，为A1品；采用的乐果适配体的序列如Seq ID No.1所示；

上述碳点CDs溶液的配制可通过下述方法获得：

0.备料：1.26 g固体柠檬酸、1608 μL液体乙二胺和30 mL双蒸馏水，将1.26 g固体柠檬酸和1608 μL液体乙二胺溶解在30 mL双蒸馏水中，然后将溶液转移到聚四氟乙烯衬里的高压釜中，并在180 ℃下加热5 h，接着再对溶液在MW为300的条件下进行透析处理，然后再置于80 ℃真空干燥箱中干燥8-12 h成固体，最后加入双蒸馏水制成浓度为0.5 mg/mL的储备溶液，4 ℃下保存以备使用；

A2：取离心管，用二蒸水替代已知浓度的乐果标准液，按照A1的方法即可制备得到空白对照溶液，为A2品；

A3：取A1品和 A2品分别用荧光光度计进行扫描测定440 nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，获得其荧光发射光谱；

A4：根据荧光发射光谱，将不同浓度的A1品与A2品之间的荧光强度差值作为纵坐标，乐果浓度作为横坐标绘制得到乐果浓度与荧光强度变化量标准曲线

B、根据乐果浓度与荧光强度变化量标准曲线建立有关乐果浓度与荧光强度之间相互关系的线性回归方程；

C：制备待测乐果浓度的待测溶液，得C品；在制备C品时，用实际样液替代已知浓度的乐果标准液，按照步骤A中制备A1品 的方法即可制备得到待测乐果浓度的待测溶液，即可为C品；

D：取C品用荧光光度计进行扫描测定440 nm处溶液的发射峰对应的荧光强度，计算C品与A2品的荧光强度差值，将该荧光强度差值代入步骤B中获得的线性回归方程中，即可获得C品中乐果的浓度。

2.根据权利要求1所述的基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法，其特征在于：所述步骤B中，当乐果浓度为6 μg/L≤C≤200 μg/L时，其浓度与荧光强度之间相互关系的线性回归方程为：y=0.5961C+2.02737；

y为荧光强度差值=A2品的荧光强度-含乐果的待测品的荧光强度。

3.根据权利要求1所述的基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法，其特征在于：所述的盐离子溶液的浓度为10-25 mM；纳米银AgNPs溶液的浓度为0.38-0.55 nM；碳点CDs溶液的浓度为2-7 μg/mL。

4.根据权利要求1所述的基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法，其特征在于：所述的A1品、A2品或C品制备过程中：在刻度离心管中加入已知浓度的乐果标准液、二蒸水或实际样液，和乐果适配体混匀后置于28—32 ℃条件下孵育8—15 min，然后加入纳米银AgNPs溶液，混匀后置于28—32 ℃条件下再孵育8—15 min，之后加入碳点CDs溶液、盐离子溶液、双蒸馏水混匀后置于28—32 ℃条件下再孵育28—35 min。

5.根据权利要求1所述的基于适配体调控碳点荧光的乐果农药检测方法，其特征在于：所述的A1品、A2品或C品制备过程中：已知浓度的乐果标准液、二蒸水、实际样液、乐果适配体的用量为5.0 μL；纳米银AgNPs溶液的用量为150.0 μL；盐离子溶液的用量为：25.0 μL；碳点CDs溶液用量为5.0 μL；最后加入310.0 μL双蒸水得到500 μL的最终体积。