[发明专利]一种基于双重信号放大的啶虫脒传感器及其检测方法

权利要求书

1.一种基于双重信号放大的啶虫脒传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)玻碳电极的预处理；

(2)还原性氧化石墨烯-纳米银复合材料rGO-AgNPs的制备：25mg氧化石墨烯溶于50ml去离子水，在40KHz、150W的条件下超声90分钟，使其完全溶解，将得到的氧化石墨烯分散液，于常温时加入20mg的AgNO₃和0.275g的柠檬酸钠反应30分钟，升温至98摄氏度后加入350μl 35％的氨水和28mg 80％的水合肼，搅拌反应4小时，趁热3000rpm离心15min，收集沉淀物，用去乙醇和去离子水多次清洗直至pH呈中性；

(3)普鲁士蓝-纳米金PB-AuNPs复合薄膜沉积液和稳定液的制备：将0.05g壳聚糖溶于100mL 1.0％的醋酸溶液中，室温下搅拌3h，配成0.05％壳聚糖溶液，然后称取0.0625gFeCl₃，0.0822g K₃[Fe(CN)₆]，0.7455g KCl以及1mL浓盐酸加入100mL上述得到的壳聚糖溶液中，在室温下超声分散，直至得到稳定的暗绿色分散液，再将制备好的1mL的纳米金胶加入已混合好的上述溶液中，再在室温下超声分散0.5h至完全溶解，备用；

(4)适配体传感器的组装：在玻碳电极表面滴加6μL(2)中制备的rGO-AgNPs滴加到电极表面并在常温下晾干得到rGo-AgNPS/GCE；将玻碳电极浸在新配制的电沉积底液，运用循环伏安法对其扫描，扫描电压为-0.6-0.2V，扫描速度为0.05V/s，沉积圈数为12，然后电极在稳定液中在-0.6V-0.2V之间扫描循环伏安图直至图像稳定得到PB-AuNPs/rGo-AgNPS/GCE，将0.5％牛血清蛋白溶液滴涂在制备好的电极表面，孵育30分钟以封闭非特异性结合位点，用超纯水轻轻冲洗除去多余的BSA，最后，将制备的BSA/Apt/rGO-CuNPs/SPCE生物传感器存储在4℃温度冰箱，备用，所述核酸适配体的碱基序列为5'-SH-TGTAATTTGTCTGCAGCGGTTCTTGATCGCTGACACCATATTATGAAGA-3'；

(5)啶虫脒农药的测定：电化学测试条件均为在pH 7.4的铁氰化钾溶液(5mmol/L of[Fe(CN)6]^3-/4-，0.1mol/L of KCl)中采用循环伏安法进行扫描，记录上述制备好的适配体传感器被目标物溶液孵育前后的还原峰值电流变化，根据所得电流差值的大小反映农药浓度。