[发明专利]NLRP3抑制剂组合物及其应用

说明书

本发明涉及一种NLRP3抑制剂组合物，包含脂质体组分、NLRP3抑制剂和靶向多肽；还涉及上述组合物在制备用于治疗或预防动脉粥样硬化的药物中的应用；一种防止LDL穿过内皮细胞的方法，包括使用上述组合物处理所述内皮细胞的步骤。本发明证明了NLRP3可作为调节LDL对HUVECs的穿胞作用的靶点，并且根据该靶点制备了多肽靶向的阳离子脂质体siRNA传递系统。该脂质体siRNA传递系统可特异性的将siRNA输送至炎症激活的内皮细胞，并有效沉默相关基因表达，从而抑制LDL的穿胞和LDL在血管内皮下的沉积滞留，也可用作抗动脉粥样硬化新的靶向药物。

技术领域

本发明涉及用于心血管防治的生物医药领域，更特别地，涉及一种NLRP3抑制剂组合物，及其在制备用于治疗或预防动脉粥样硬化的药物中的应用，以及一种防止LDL穿过内皮细胞的方法。

背景技术

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是大多数心脑血管疾病的发病基础，是引起老年人死亡的主要原因之一，其发病机制迄今尚未完全阐明。近年来被广为接受的发病机制为“滞留-反应学说”，该学说强调动脉粥样硬化的始动环节是含apo-B的脂蛋白颗粒(主要是低密度脂蛋白LDL等)在内皮下滞留：血液中的LDL经血管内皮细胞转运至血管内膜下，LDL被氧化并引发慢性非可控性炎症，诱导免疫细胞进入血管内膜下并发生一系列反应，形成血管局部病变，进一步加重后形成粥样斑块。在此过程中，LDL穿过内皮细胞进入到内皮下至关重要。有研究显示，LDL是通过穿胞途径进入的。进一步研究显示，CRP、TNFα等炎症因子会促进LDL跨内皮细胞穿胞，进而促发动脉粥样硬。

巨噬细胞的损伤会导致内皮下和坏死组织中胆固醇小结晶的产生，激活NLRP3炎症小体，NLRP3炎症小体由感受蛋白NLRP3(NACHT,LRR and PYD domains-containingprotein 3)、含有CARD的衔接子凋亡相关的Speck样蛋白(Apoptosis associated speck-like protein containing a CARD，ASC)与炎症相关半胱天冬酶-1(Pro-caspase-1)组成。有研究显示，人颈动脉斑块中NLRP3、ASC、IL-1β的表达也明显高于正常组。

目前，已有多种针对AS的治疗方案，如抗LDL治疗、抗TNFα治疗、信号通路抑制剂等，均取得一定的效果。但是，尚无报道阐释清楚NLRP3在动脉粥样硬化中的作用，也没有报道在内皮细胞中以NLRP3为靶点来调节LDL穿胞和沉积来治疗动脉粥样硬化。

发明内容

为解决以上问题，本发明提供了一种NLRP3抑制剂组合物，其特征在于，包含脂质体组分、NLRP3抑制剂和靶向多肽。

在一个具体实施方案中，所述NLRP3抑制剂为NLRP3基因的siRNA。

在一个优选实施方案中，所述siRNA靶向的序列如SEQ ID NO:1所示。

在一个优选实施方案中，所述脂质体组分包括DOTAP、DOPC、Chol、DSPE-PEG₂₀₀₀和MAL-DSPE-PEG₂₀₀₀。

在一个优选实施方案中，DOTAP、DOPC、Chol、DSPE-PEG₂₀₀₀和MAL-DSPE-PEG₂₀₀₀的摩尔比为40:35:20:4:1。

在一个具体实施方案中，所述靶向多肽可与皮表达血管细胞粘附分子1特异性结合。

在一个优选实施方案中，所述靶向多肽的序列如SEQ ID NO:3所示。

本发明还提供了上述组合物在制备用于治疗或预防动脉粥样硬化的药物中的应用。

本发明还提供了一种防止LDL穿过内皮细胞的方法，通过使用上述组合物处理所述内皮细胞来实现。