[发明专利]一种野外真菌提纯方法在审
| 申请号: | 201910759055.3 | 申请日: | 2019-08-16 |
| 公开(公告)号: | CN110358682A | 公开(公告)日: | 2019-10-22 |
| 发明(设计)人: | 罗杰彬;张勇;赵斌;司徒春南;王健 | 申请(专利权)人: | 贵州正春林业科技服务有限公司 |
| 主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M1/24;C12M1/22;C12M1/12;C12N3/00;C12N1/14;C12N1/02;C12R1/645 |
| 代理公司: | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人: | 向林 |
| 地址: | 563000 贵州省遵义市汇川区温*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 培养皿 真菌孢子 微孔滤膜 接种针 提纯 真菌 指型 野外 微生物防治 分生孢子 昆虫体表 上密封盖 套管内管 提纯装置 外部空气 杂菌污染 培养基 白僵菌 封口液 套管式 套管 孢子 虫体 管内 内管 杂菌 制备 密封 移植 感染 概率 移动 制作 | ||
1.一种野外真菌提纯方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、制备提纯装置,包括套管式接种针和指型套管,所述套管式接种针包括接种针本体、固定管、保护管和操作管,所述接种针本体的一端设有用于挑取菌种的接种针针尖,另一端固定连接在固定管内,接种针本体和固定管均位于保护管内,且固定管与保护管滑动连接,所述保护管的一端设有针尖部,另一端固定连接在操作管内,所述操作管上滑动套接有磁铁环,所述固定管内固定连接有与磁铁环匹配的磁性棒;所述培养皿可拆卸连接有密封盖,所述密封盖上开设有通孔,所述通孔固定连接有第一微孔滤膜;所述指型套管包括内管和外管,所述内管内放置有培养基,内管的管口固定连接有第二微孔滤膜,所述内管可拆卸连接在外管的内部,所述外管可拆卸连接有密封帽;
步骤二、制作封口液:将酒精和虫胶片按体积比1:1混合,然后置于55~65℃的水浴箱中,待虫胶片完全融化,得到虫胶片酒精溶液;
步骤三、将感染白僵菌的虫体放在培养皿中,盖上密封盖后进行培养,至昆虫体表产生白粉状分生孢子;
步骤四、打开指型套管的外管的密封帽,将接种针本体收入保护管内,用保护管的针尖部刺穿培养皿上的第一微孔滤膜,滑动环形磁铁,带动磁性棒以及固定管移动,从而将接种针针尖从保护管中伸出,然后用接种针针尖挑取虫体上的白粉状分生孢子,接着将带有孢子的接种针针尖移动到保护管内,再用针尖部刺穿内管上的第二微孔滤膜,将接种针针尖上的孢子接种到培养基中;
步骤五、用乙醇洗瓶将虫胶片酒精溶液滴到第一微孔滤膜和第二微孔滤膜上的针尖部刺穿后留下的通孔上,进行密封。
2.根据权利要求1所述的一种野外真菌提纯方法,其特征在于:所述步骤二中将虫胶片酒精溶液装入乙醇洗瓶内。
3.根据权利要求2所述的一种野外真菌提纯方法,其特征在于:所述第一微孔滤膜和第二微孔滤膜的孔径均为45um。
4.根据权利要求3所述的一种野外真菌提纯方法,其特征在于:所述第一微孔滤膜和第二微孔滤膜均采用聚丙烯滤膜。
5.根据权利要求4所述的一种野外真菌提纯方法,其特征在于:所述培养皿、外管和内管均为透明的玻璃制成。
6.根据权利要求5所述的一种野外真菌提纯方法,其特征在于:所述第一微孔滤膜和培养皿之间采用硅酮玻璃胶粘接,所述第二微孔滤膜和内管之间也采用硅酮玻璃胶粘接。
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