[发明专利]一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因、克隆方法及其应用在审
| 申请号： | 201910744077.2 | 申请日： | 2019-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN110295184A | 公开（公告）日： | 2019-10-01 |
| 发明（设计）人： | 王崇;梁银铨 | 申请（专利权）人： | 水利部中国科学院水工程生态研究所 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N9/02 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 杨采良 |
| 地址： | 430078 湖北省武汉市*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 裂腹鱼 短须 克隆 铜锌超氧化物歧化酶基因 超氧化物歧化酶基因 全序列 生物基因工程技术 超氧化物歧化酶 开放阅读框 提取总RNA 第一条链 分子机理 中间序列 反转录 抗氧化 扩增 拼接 肝脏 应用 研究 | ||
1.一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因，其序列见SEQ ID NO.11。
2.根据权利要求1所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因，其特征在于，所述基因序列共801bp，包括完全开放阅读框465bp，5'端非编码区为60bp，3'端非编码区为276bp。
3.根据权利要求1所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因，其特征在于，所述基因序列推导编码的氨基酸序列见SEQ ID NO.12。
4.如权利要求1-3任一所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：提取总RNA并逆转录为cDNA；
步骤2：根据已知的多种动物Cu/Zn-SOD基因的保守区序列设计引物，PCR克隆Cu/Zn-SOD基因中间片段；
步骤3：获取目标基因5’端序列；
步骤4：获取目标基因3’端序列；
步骤5：将步骤2、步骤3和步骤4获得的序列片段进行拼接，获得全长序列。
5.根据权利要求4所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于：步骤2中根据已知的多种动物Cu/Zn-SOD基因的保守区序列设计的引物序列见SEQID NO.1和SEQ ID NO.2。
6.根据权利要求4所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于：步骤3中涉及的引物序列见SEQ ID NO.4-SEQ ID NO.6。
7.根据权利要求4所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆方法，其特征在于：步骤4中涉及的引物序列见SEQ ID NO.8-SEQ ID NO.9。
8.如权利要求1-3任一所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因在短须裂腹鱼超氧化物歧化酶相关研究中的应用。
9.如权利要求4-7任一所述的一种短须裂腹鱼铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆方法在短须裂腹鱼超氧化物歧化酶相关研究中的应用。
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