[发明专利]一种白背天葵多酚的提取工艺及其分离纯化方法

说明书

本发明公开了一种白背天葵多酚的提取工艺及其分离纯化方法。白背天葵多酚超临界CO₂提取最优工艺为：萃取压力35MPa，萃取时间2 h，萃取温度40℃，CO₂流量20 L/h。白背天葵多酚的最优纯化工艺为:DM130树脂为最优树脂，上样液浓度为1 mg/mL，pH值为3.1，上样液流速为2 mL/min，解吸的乙醇体积分数为70%，体积为60 mL，流速为2 mL/min。在此条件下，白背天葵多酚的含量由粗提物中的14.73%提高到纯化物中的45.21%。体外抗氧化试验表明，白背天葵多酚对DPPH及ABTS自由基的清除率随其浓度的提高而提高。体内抗氧化试验表明，白背天葵多酚提取物能显著提高衰老模型组血清及肝组织中SOD、GSH‑Px、CAT活性并降低MDA含量。

技术领域

本发明属于植物有效成分的提取技术领域，具体涉及一种白背天葵多酚的提取工艺及其分离纯化方法。

背景技术

白背天葵为菊科三七草属植物，又名白凤菜、白背三七，福建漳州地区称为“片仔癀草”。在福建、广东、海南等地多有分布。它是一种保健药膳和珍稀蔬菜，有“最佳保健药膳蔬菜”之称。白背天葵营养丰富，味道鲜美，且全草可入药，白背天葵所含的多酚类化合物具有广泛的生物活性，如具有抗炎，抗氧化、抗癌、防治心脑血管疾病等作用。因此，对白背天葵多酚进行提取并分离纯化，对于开发利用白背天葵多酚化合物具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种白背天葵多酚的提取工艺及其分离纯化方法，旨在为进一步开发利用白背天葵多酚提供依据。。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种白背天葵多酚的提取工艺，其包括以下步骤：

1)取白背天葵茎叶部分烘干后粉碎过筛，得到白背天葵粉末；

2)取300g白背天葵粉末装入萃取釜中，在萃取压力为30-40MPa，萃取时间为1.5-2.5h，萃取温度为35-45℃，CO₂流量为15-25L/h，夹带剂为浓度90％乙醇的条件下进行超临界CO₂提取,，提取物经真空冷冻干燥机干燥24h，得到白背天葵多酚粗提物。

进一步的，步骤1)所述烘干温度为60-65℃，筛网目数为60目。

作为优选，步骤2)所述萃取压力为35MPa，萃取时间为2h，萃取温度为40℃，CO₂流量20L/h。

一种白背天葵多酚的分离纯化方法，其包括以下步骤：

1)选取DM130树脂为纯化白背天葵多酚粗提物的树脂，对DM130树脂进行预处理；

2)称取12g预处理好的DM130树脂，选取16mm×20cm(柱体积约为20mL)的玻璃层析柱进行湿法装柱，以白背天葵多酚提取物为上样液进行吸附，上样液质量浓度为0.5-1.5mg/mL，上样液pH值为3-3.5，上样量为150mL，用恒流泵调节上样液流速为1.5-2.5mL/min；

3)吸附完全后，用体积分数为65-75％的乙醇溶液60mL以流速为1.8-2.2mL/min进行洗脱；

4)洗脱液经浓缩，真空冷冻干燥，得到白背天葵多酚纯化物。纯化结果表明，白背天葵多酚粗提物中多酚的含量为14.73％，经DM130树脂纯化后多酚的含量为45.21％，约为纯化前的3.07倍。

进一步的，步骤1)所述预处理如下：将DM130树脂用95％乙醇浸泡24h后，用蒸馏水洗涤至无醇味，再用5％HCl溶液浸泡12h，蒸馏水洗至中性，最后用5％NaOH溶液浸泡12h，蒸馏水洗至中性，将树脂滤干备用。

作为优选，步骤2)所述上样液质量浓度为1mg/mL，上样液pH值为3.1，上样液流速为2mL/min。