[发明专利]基于透皮吸收制备雨生红球藻中虾青素的方法

说明书

本发明提供一种基于透皮吸收制备以及评价雨生红球藻中虾青素的方法，该方法包括以下步骤：(1)雨生红球藻的提取工艺采用正己烷‑乙醇有机混合溶剂对雨生红球藻进行超声提取；(2)产物的树脂吸附将上述提取液加入大孔树脂吸附，吸附结束后，水洗中性，再用乙醇溶液洗脱，减压回收洗脱液放置结晶，滤出得粗结晶；(3)样品的透皮吸收用人造生物膜模拟人体表皮皮肤，然后于生理盐水中浸泡处理后，作为透皮屏障，以粗结晶为透皮释放液，以乙醇‑生理盐水为透皮吸收液，于恒温恒速的条件下进行透皮吸收试验，间隔一段时间后移取适量透过液，再补充相同体积的乙醇‑生理盐水，分离出易被皮肤吸收的成分。

技术领域

本发明属于生物医药、保健食品、化妆品等领域。具体涉及涉及基于透皮吸收制备以及评价雨生红球藻中虾青素的方法

背景技术

虾青素(3，3’-二羟基-β，β’-胡萝卜素-4,4’-二酮)是一种橙红色的酮式类胡萝卜素，广泛存在于虾、蟹、观赏鱼、火烈鸟以及某些藻类、菌类等。分子结构中共轭二烯及不饱和羰基的存在，使得虾青素具有超强的抗氧化性，除此之外，虾青素还表现出重要的生物功能如抗肿瘤、抗炎、美白防晒、抗动脉粥样硬化、增强免疫力、降低紫外线损伤、防癌、减少慢性疾病等。因此虾青素广泛的应用于医药、食品、化妆品等行业。目前，虾青素的生产工艺包括生物制备及化学合成，由于化学合成的虾青素在结构、功能、安全性应用等方面均逊色于生物制备虾青素，同时天然虾青素是唯一的一种可以穿过血脑屏障的类胡萝卜素。

因此，天然虾青素的生产研究一直是一个重要的领域。天然虾青素的生物来源有三种:水产品加工的废物、法夫酵母及雨生红球藻。其中，水产品加工的废物中虾青素含量低，提取成本高，不适合大规模生产。法夫酵母作为，天然虾青素的来源之一，绿色安全、生长周期短，但是生产工艺较复杂并且虾青素的平均积累含量低于雨生红球藻，因此雨生红球藻作为目前已知的虾青素，积累量最高的物种成为天然虾青素的优良来源。

当前雨生红球藻虾青素的提取方法主要为超临界CO₂提取和机溶剂提取两类。超临界CO₂提取能较好地保持虾青素的活性，但设备昂贵，且运行成本较高。相比之下，有机溶剂提取法简单、易于操作放大、后续分离技术成熟，成本低。二氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮等均可用于提取雨生红球藻中的虾青素，然而这些溶剂或多或少均存在一定的毒性。选择一种低毒、高效的溶剂，是溶剂法提取虾青素的一个关键瓶颈问题。

有机溶剂浸提法具有处理量大，能耗低，速度快，对设备要求简单等特点，并易于实现连续操作和自动化控制。采用有机溶剂法提取虾青素较其它方法更利于实现工业化生产。

但是，化妆品或食品经透皮到达人体环境是否得起到预期的作用和功效，这些都不得而知。

发明内容

针对目前对雨生红球藻的提取工艺，直接采用有机溶剂浸提法进行提取，再进行树脂吸附。本发明建立一种基于皮肤表层的测定样品透皮吸收率的新评价方法，结合传统提取工艺，模拟人体血脑屏障，分离出易被吸收的成分，从而建立了一种生物相关性更强，更接近动物试验水平，更科学有效的提取方法。

本发明通过在体外模拟人体表皮皮肤进行透皮吸收实验，以分离出易被皮肤吸收的成分，从而对样品的虾青素含量进行相关的检测。具体而言，本发明在提取上采用最简单通用的有机溶剂浸提法，该方法实用性强，对设备要求简单等特点，并易于实现连续操作和自动化控制；

本发明首次提出在传统提取工艺之后，再近一步通过体外模拟人体表皮皮肤透皮吸收实验，分离出易被皮肤吸收的成分，再对其进行结构鉴定和含量测定。在提取工艺上选择了简单通用的有机溶剂浸提法和树脂吸附法，该方法实用性强，对设备要求简单等特点，并易于实现连续操作和自动化控制。

本发明目的通过如下技术方案实现：

基于透皮吸收制备以及评价雨生红球藻中虾青素的方法，该方法包括以下步骤：

(1)雨生红球藻的提取工艺