[发明专利]脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法

说明书

本发明提供一种在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型及其的制备方法，将幼龄动物进行单侧颈总动脉结扎术后，进行缺氧2h～3.5h后，送回母鼠身边，饲养3w～5w，存活的动物的腹腔内注射匹罗卡品诱发出Racine标准四级及四级以上癫痫，获得在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型。本发明的动物模型，其建立方法简单，动物模型的存活率高，存活率为70％以上，模型动物存在学习及长期记忆功能的损害，但短期记忆无损伤，脑电图除可发现无临床发作的电发作即脑电波的异常外，还有可有临床发作的癫痫发作，可广泛应用于不同治疗方法对合并颞叶癫痫的脑瘫患儿的疗效评价，尤其可用于存在认知损害的脑瘫合并颞叶癫痫患儿疗效评估。

技术领域

本发明属于神经系统疾病的研究领域，特别涉及一种合并颞叶癫痫的脑瘫疾病模型的造模方法。

背景技术

脑性瘫痪，是指先天或围生期由多种不同原因造成的中枢神经系统损害，以非进行性的运动障碍为主的一组疾病，主要表现为中枢性运动障碍、肌张力异常、姿势及反射异常，并可同时伴有癫痫，智力低下，语言障碍，视觉及听觉障碍等合并症。本病的发病率较高，国际上脑瘫的发病率为1‰-5‰，我国脑瘫患儿的发病率为1.8‰-4‰，脑瘫的临床表现多种多样，根据运动功能障碍的范围和性质可分为痉挛性、手足徐动型、强直型、共济失调型、震颤型、肌张力低下型和混合型，多采用大鼠幼鼠缺血缺氧方法复制脑瘫疾病，这种动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。脑瘫的发生发展十分复杂，以人本身作为实验对象来深入探讨脑瘫的发生机制，推动医药学的发展来之缓慢，临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性，而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究，可以有意地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素，以便更准确地观察模型的实验结果并与脑瘫进行比较研究，有助于有效地认识脑瘫的发生发展规律及研究防治措施。但大鼠幼鼠缺血缺氧的脑瘫模型仅能复制出部分和人相似的临床表现，更无法复制出脑瘫相关的合并症，如癫痫。癫痫发作不仅可引起脑部神经元的坏死或病理性凋亡及神经生物改变，而且，还常常引起患者及家属严重的心理障碍。癫痫患者经常具有羞耻感、不合群、活动受限，保护过度或孤独感是临床上最为常见的社会心理问题。

脑瘫患儿主要为运动功能的损害，部分患儿也存在认知功能障碍，脑瘫患儿易继发癫痫的发生，癫痫的发生会进一步加重脑部的损伤和认知功能障碍的恶化，而脑瘫患儿继发癫痫的类型并没有统一的说法，在查阅资料的过程中发现，部分性发作及全身强直阵挛发作均占很高的比例(50％)。目前还没有相关合并癫痫的脑瘫动物模型供于使用，故对进一步了解具有合并癫痫的脑瘫疾病的发生发展过程以及防治治疗方法均非常不利。

发明内容

鉴于上述现有技术中存在的问题，本发明提供一种新的既有颞叶癫痫又有脑瘫的动物模型。本发明能够在现代生物医学研究中得到广泛应用，有助于有效地认识人类疾病的发生、发展规律和研究防治措施。

本发明的技术方案如下：

本发明的一方面，提供一种在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法，包括以下步骤：

(1)将幼龄动物进行单侧颈总动脉结扎术后，进行缺氧2h～3.5h，获得存活的第一动物；

(2)将第一动物送回母鼠身边，饲养3w～5w，获得存活的第二动物；

(3)第二动物的腹腔内注射匹罗卡品诱发出Racine标准四级及四级以上癫痫，获得存活的第三动物；

(4)对于连续发作1h～1.5h的Racine标准四级及四级以上癫痫的第三动物，终止癫痫发作，得到脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型。

在上述技术方案中，所述第一动物为缺血缺氧脑瘫动物模型，即，先进行缺血手术，再进行缺氧操作而获得。所述缺血手术可采用本领域常规手段，优选地，可采用单侧颈总动脉结扎术，单侧颈总动脉结扎后将动物放入37℃保温箱中休息1～3h，再进行缺氧操作，缺氧时间优选为2～3.5小时，更优选为2h。