[发明专利]脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法有效
申请号: | 201910702959.2 | 申请日: | 2019-07-31 |
公开(公告)号: | CN110269046B | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
发明(设计)人: | 刘晶;张宏云;邹伟;马静云 | 申请(专利权)人: | 大连医科大学附属第一医院 |
主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02 |
代理公司: | 大连东方专利代理有限责任公司 21212 | 代理人: | 李银姬;李馨 |
地址: | 116011 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 脑瘫 基础上 癫痫 动物 模型 建立 方法 | ||
1.一种在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将幼龄动物进行单侧颈总动脉结扎术后,进行缺氧2h~3.5h,获得存活的第一动物;
(2)将第一动物送回母鼠身边,饲养3w~5w,获得存活的第二动物;
(3)第二动物的腹腔内注射匹罗卡品诱发出Racine标准四级及四级以上癫痫,获得存活的第三动物;
(4)对于连续发作1h~1.5h的Racine标准四级及四级以上癫痫的第三动物,终止癫痫发作,得在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型。
2.根据权利要求1所述的在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法,其特征在于,在步骤(1)中所述的幼龄动物为7日龄动物。
3.根据权利要求1所述的在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述缺氧条件为37±0.5℃、O2含量为8%±0.5。
4.根据权利要求1所述的在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,匹罗卡品的注射量为10mg/kg~60mg/kg。
5.根据权利要求1所述的在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,第二动物的腹腔内注射匹罗卡品之前进行如下前处理:注射匹罗卡品18-24h之前,对于第二动物进行腹腔注射氯化锂127mg/kg,放回饲养室饲养,在注射匹罗卡品30min之前,腹腔注射东莨菪碱10mg/kg。
6.根据权利要求1所述的在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法,其特征在于,在所述步骤(3)中,注射匹罗卡品诱发出癫痫Racine标准四级及四级以上的方法包括如下步骤:
a)第二动物的腹腔内注射匹罗卡品10mg/kg诱发癫痫,注射匹罗卡品30min后成功诱发出Racine标准四级或四级以上癫痫的、存活的动物作为第三动物;
b)在步骤a)中,对于注射匹罗卡品30min后未成功诱发出Racine标准四级或四级以上癫痫的、存活的动物,再次腹腔注射匹罗卡品10mg/kg;
c)对于在步骤b)中,注射匹罗卡品30min后未成功诱发出Racine标准四级或四级以上癫痫的动物,反复步骤b),直至成功诱发出Racine标准四级及四级以上的癫痫,其中,所述反复次数小于6次。
7.根据权利要求1所述的在脑瘫基础上的颞叶癫痫动物模型的建立方法,其特征在于,在步骤(4)中,所述终止癫痫发作,包括如下步骤:将连续发作1h的Racine标准四级或四级以上癫痫的第三动物,腹腔注射10%水合氯醛350mg/kg终止发作,发作终止后腹腔注射5%葡萄糖生理盐水,饲养,饲养的前3天,每4h进行腹腔或皮下注射一次5%葡萄糖生理盐水。
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