[发明专利]一种含色素组织免疫组化染色试剂盒及染色方法

权利要求书

1.一种含色素组织免疫组化染色试剂盒，其特征在于：包括过氧化物酶封闭剂、过氧化物酶标二抗聚合物、基于过氧化物酶系统的蓝染底物、与蓝染底物匹配的蓝染缓冲液和红色衬染剂；所述蓝染底物中包括：联苯3,3,’4,4’-四氯化四亚铵、6-甲氧基-2-萘酚、Tris-HCl、氯化钠和丙二醇；所述蓝染缓冲液中包括NiCl₂、H₂O₂、Tris-HCl、氯化钠和甘油。

2.根据权利要求1所述的含色素组织免疫组化染色试剂盒，其特征在于：所述蓝染底物的pH为7.3-7.9；所述蓝染底物中联苯3,3,’4,4’-四氯化四亚铵、6-甲氧基-2-萘酚、Tris-HCl 缓冲液、氯化钠和丙二醇的质量-摩尔-体积比为8-12g：0.3-0.7g：0.05-0.15mol：0.05-0.15mol：450-550mL。

3.根据权利要求1所述的含色素组织免疫组化染色试剂盒，其特征在于：所述蓝染缓冲液的pH为7.3-7.9；所述蓝染缓冲液中NiCl₂·6H₂O、H₂O₂、Tris-HCl、氯化钠和甘油的质量-摩尔-体积比为4-7g：0.5-1.5g：0.05-0.15mol：0.05-0.15mol：45-55mL。

4.一种含色素组织免疫组化染色方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）取待检测的含色素组织切片滴加过氧化物酶封闭剂，进行内源性过氧化物酶的封闭；

2）使用靶标抗体对组织切片进行孵育，然后使用过氧化物酶标二抗聚合物进行孵育；

3）使用蓝染显色液对组织切片于常温孵育染色5-10min；所述蓝染显色液中包括：基于过氧化物酶系统的蓝染底物和与蓝染底物匹配的蓝染缓冲液；

4）使用红色衬染剂对组织切片进行衬染；

所述蓝染底物中包括：联苯3,3,’4,4’-四氯化四亚铵、6-甲氧基-2-萘酚、Tris-HCl、氯化钠和丙二醇；所述蓝染缓冲液中包括NiCl₂、H₂O₂、Tris-HCl、氯化钠和甘油。

5.根据权利要求4所述的含色素组织免疫组化染色方法，其特征在于：所述蓝染底物的pH为7.3-7.9；所述蓝染底物中联苯3,3,’4,4’-四氯化四亚铵、6-甲氧基-2-萘酚、Tris-HCl缓冲液、氯化钠和丙二醇的质量-摩尔-体积比为8-12g：0.3-0.7g：0.05-0.15mol：0.05-0.15mol：450-550mL；

所述蓝染缓冲液的pH为7.3-7.9；所述蓝染缓冲液中NiCl₂·6H₂O、H₂O₂、Tris-HCl、氯化钠和甘油的质量-摩尔-体积比为4-7g：0.5-1.5g：0.05-0.15mol：0.05-0.15mol：45-55mL；

所述蓝染底物中联苯3,3,’4,4’-四氯化四亚铵的使用浓度为0.04-0.06%；所述蓝染缓冲液中氯化钠的使用浓度为0.05-0.15mol/L。

6.根据权利要求4所述的含色素组织免疫组化染色方法，其特征在于：所述含色素组织为黑色瘤组织或肺腺癌组织。

7.根据权利要求6所述的含色素组织免疫组化染色方法，其特征在于：当所述含色素组织为黑色瘤组织时，所述靶标抗体为HMB45、Melan A、S100或CD63抗体。

8.根据权利要求6所述的含色素组织免疫组化染色方法，其特征在于：当所述含色素组织为肺腺癌组织时，所述靶标抗体为EMA或CD68抗体。