[发明专利]NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法

说明书

本发明公开了一种具有较好灵敏度的NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法。该NTx检测试纸包括依次连接的标记垫、包被膜和吸水垫，标记垫上包被有NTx荧光标记抗体，包被膜在沿层析方向上依次设有检测线和质控线，检测线上包被有NTx偶联抗原，质控线上包被有抗抗体，抗抗体特异性结合NTx荧光标记抗体，检测线和质控线相互分离。本发明所提供的NTx检测试纸利用竞争侧向层析检测的原理，基于测定检测线和质控线上的荧光强度结合标准浓度曲线来测定样品中所含抗原的浓度。本发明所提供的检测试纸能够明显的提高检测的特异性，缩短检测所需时间。通过荧光标记抗体，能够明显的提高检测灵敏度。

技术领域

本发明涉及免疫检测技术领域，尤其是涉及一种NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法。

背景技术

骨质疏松症(osteoporosis)是骨形成与骨吸收发生失衡，导致钙质由骨骼往血液净移动，其症状为骨质流失和骨组织破坏，骨质脆弱，容易骨折。随着人口寿命的增长和老龄人口的增多，原发性骨质疏松代谢性疾病已成为影响健康的严重疾病之一。在我国，目前有9700万骨质疏松患者，女性占三分之二。骨质疏松症现位居中老年人五大疾病患病率之首，已成为我国乃至世界广泛关注的社会问题，骨质疏松已与冠心病癌症一样危害着人们的健康，对其之诊治有极为迫切的重要性。

退行性骨质疏松症诊断需依靠临床表现、骨密度检测、X光片及骨转换生化指标等综合分析判断。双能X射线骨密度检测是诊断骨质疏松症的金标准，如果测得的骨矿物质密度低于年青人的标准值2.5个标准方差值，即可诊断为骨质疏松症。但是，基于骨密度的检测的敏感度差，往往需要到半年甚至一年以上才能有动态变化。因此，对骨转化生化指标，特别是骨转换过程中的标志物进行检测已经成为诊断骨质疏松症的重要手段。研究发现，骨质疏松患者的骨质吸收增多表现突出，所以骨吸收标志物的表达变化研究意义较高，而骨吸收标志物中I型胶原交联N-末端肽(NTx)、Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTx)和白介素-6(IL-6)对于骨胶原降解和破骨细胞调节作用明显，对骨吸收具有促进作用，是对骨转换敏感性较好的检测指标。

目前常见的人骨代谢标志物的检测方法是胶体金免疫层析法，胶体金检测相比于ELISA更快，但在灵敏度上有待提高，无法精确测量。因此，有必要提供一种具有较好灵敏度的NTx检测产品。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何提供一种具有较好灵敏度的NTx检测试纸、NTx检测试剂盒和检测方法。

根据本发明的第一个方面，本发明提供一种NTx检测试纸，根据本发明的实施例，该NTx检测试纸包括依次连接的标记垫、包被膜和吸水垫，标记垫上包被有NTx荧光标记抗体，包被膜在沿层析方向上依次设有检测线和质控线，检测线上包被有NTx偶联抗原，质控线上包被有抗抗体，抗抗体特异性结合NTx荧光标记抗体，检测线和质控线相互分离。

本发明的有益效果是：

本发明所提供的NTx检测试纸利用竞争侧向层析检测的原理，标记垫上包被的NTx荧光标记抗体能特异性结合包被膜上检测线位置包被的NTx偶联抗原，利用膜层析在包被膜上形成NTx偶联抗原-NTx荧光标记抗体复合物，多余的NTx荧光标记抗体则在质控线与抗抗体形成抗抗体-NTx荧光标记抗体复合物。当样品中存在NTx抗原时，样品抗原与NTx荧光标记抗体结合，层析到检测线时NTx偶联抗原无法捕获与样品抗原相结合的NTx荧光标记抗体。层析到质控线上与抗抗体结合的NTx荧光标记抗体的量也发生改变。基于测定检测线和质控线上的荧光强度结合标准浓度曲线来测定样品中所含抗原的浓度。本发明所提供的检测试纸能够明显的提高检测的特异性，缩短检测所需时间。通过荧光标记抗体，能够明显的提高检测灵敏度。

根据本发明的实施例，NTx荧光标记抗体的荧光标记为荧光微球，形成NTx荧光微球标记抗体，NTx抗体与荧光微球通过肽键共价结合，从而提高标记物的稳定性，避免了抗体空间位阻的影响，有利于提高灵敏度和特异性。