[发明专利]一种蛇足石杉内生绿藻及其应用

说明书

本发明公开了一种蛇足石杉内生绿藻及其应用，该绿藻的分类命名为胶球藻(Coccomyxa sp.)，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2019年4月26日，保藏编号：CGMCC17587，将该胶球藻辅助于蛇足石杉无菌材料的建立和野生植株的移栽，可显著提高蛇足石杉无菌材料和野生植株的移栽成活率。本专利为蛇足石杉无菌材料的建立和野生植株的移栽提供重要的方法。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种蛇足石杉内生绿藻及其应用。

背景技术

蛇足石杉(Huperzia serrata(Thunb.)Trev.)为石松目(Lycopodiales)石杉科(Lycopodiaceae)石杉属(Lycopodium L.)多年生草本蕨类植物。蛇足石杉在民间主要用于治疗跌打肿痛、内伤出血、毒虫毒蛇咬伤、烧伤烫伤等病症。蛇足石杉生长缓慢，野生状态其的繁殖主要以孢子繁殖为主，孢子萌发周期长，萌发后属地下生配子体，需6-15 年才能成熟。

1927年我国科技工作者报道了从该植物中分离的石杉碱甲具有横纹肌松弛作用，之后的大量研究发现石杉碱甲是一种高效、低毒、可逆和高选择性的乙酰胆碱酯酶抑制剂。现在，被石杉碱甲及经作为治疗阿尔茨海默病(AD，Alzheimer disease)的药物，同时在美国被用做益智的营养保健品。目前，由于化学合成的石杉碱甲临床副作用较大，其来源主要依赖于野生资源，提取率仅为0.006％-0.1％。因此，逐年下去，野生蛇足石杉的资源面临枯竭，而且其生长地的生态环境面临人为严重破坏。

因此，人们开始通过两条途径占看对野生蛇足石杉和当地生态环境的保护。第一个是通过植物组织培养平台大量繁殖蛇足石杉；第二个是通过对野生蛇足石杉的异地移栽从而减轻对当地生态环境的破坏。但是无论是在蛇足石杉人工繁殖方面还是异地移栽方面都没有实现产业化，其原因就是成功率太低。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种蛇足石杉内生绿藻，该腐绿藻的分类命名为胶球藻(Coccomyxa sp.)，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2019年04月26日，保藏编号：CGMCC17587，并利用CGMCC17587提高蛇足石杉无菌材料的培养效率和野生植株的移栽成活率。

一种蛇足石杉内生绿藻，所述蛇足石杉内生绿藻的名称为胶球藻，Coccomyxasp.，该胶球藻的保藏编号为CGMCC17587。

本发明所述的蛇足石杉内生绿藻用于制备蛇足石杉无菌材料培养基的应用。

可选的，按质量百分数计，将5％～15％的蛇足石杉内生绿藻菌体培养液加入MS培养基即得。

可选的，按质量百分数计，将10％的蛇足石杉内生绿藻的菌体培养液加入MS培养基即得。

可选的，所述的蛇足石杉内生绿藻菌体培养液的制备包括：蛇足石杉内生绿藻采用 MS培养基进行摇瓶液体培养，培养温度30℃，摇床转速60转/分钟，培养20天后，收集上清液即得。

可选的，用蛇足石杉无菌材料培养基进行蛇足石杉无菌材料的培养方法包括：将蛇足石杉无菌材料接种到蛇足石杉无菌材料培养基中，培养温度为25℃，光照强度为2500Lux，培养时间为60天。

本发明所述的蛇足石杉内生绿藻用于制备蛇足石杉植株移栽促生液的应用。

可选的，所述的蛇足石杉植株移栽促生液为蛇足石杉内生绿藻菌体培养液。

可选的，蛇足石杉内生绿藻菌体培养液的制备包括：蛇足石杉内生绿藻采用MS培养基进行摇瓶液体培养，培养温度30℃，摇床转速60转/分钟，培养20天后，收集上清液即得。