[发明专利]胶乳分散体的制备方法及试剂盒

说明书

本发明涉及一种胶乳分散体的制备方法和试剂盒，所述方法为制备负载了生物活性物质的聚合物胶乳的分散体的方法，所述方法包括以下步骤：a)将胶乳在高速剪切机中进行机械碾磨，得到含有大颗粒胶乳粒子的分散体，所述大颗粒胶乳粒子的平均粒径为50～1000μm；b)将所得含有大颗粒胶乳粒子的分散体在高压均质机中在0～30℃下进行均质化，得到胶乳分散体，所述乳胶分散体中乳胶颗粒的平均粒径为50～500nm。本发明的胶乳分散体的制备方法具有时间短、效率高等优点，可得到性能好、产能放大的产品，同时改善了工作环境。

技术领域

本发明属于临床医学诊断制品领域，特别涉及一种胶乳、尤其是在即时检测领域(Point of Care Testing，POCT)中使用的蛋白载体用胶乳的分散方法。

背景技术

目前，基于负载有生物活性物质的胶乳分散体系已经得到广泛的应用。通过各种改性或者负载手段，将具有特定功能性物质，例如抗体等物质负载于胶乳分散体的颗粒表面，以实现各种检测方面的应用。典型地，可以将这样的具有生物活性的胶乳分散体用于试剂盒类型的检测。

通常，作为胶乳的材质，可以为各种有机聚合物形成的颗粒，并通过化学和/或物理手段在其表面进行生物活性物质的负载。例如，目前在POCT(即时检测)领域中，胶乳与NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)、EDC(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)进行活化处理，处理完毕后再与相应的抗体进行化学偶联，从而作为蛋白载体再参与免疫反应，故在此过程中胶乳必须保持较高的活性与均一性。在整个阶段的反应过程中，必须保持胶乳溶液的均一性以及纯度。

通常情况下，在上述阶段反应完成负载后，收集胶乳中的固体颗粒，此时的颗粒具有较大的粒径。为了得到尺寸更小的固体颗粒分散体，进一步使用溶剂进行部分溶解形成分散体系，并以磁力搅拌机或者人工碾磨进行加速溶解，当肉眼观测无大块沉淀物时，再采用超声波细胞粉碎机进行超声处理分散胶乳，最终得到的分散胶乳还需通过过滤方式除去未分散开的大颗粒胶乳。

因此，目前获得粒径较小，且分散均一的胶乳通常需要引入较为复杂的固体颗粒粉碎过程。在整个工艺过程中，当采用人工碾磨或磁力搅拌方式进行碾碎，分散时间长影响产品性能，并且无法保证所有大块沉淀物碾碎。

另一方面，在整个工艺过程中，当采用超声波细胞粉碎机再次进行均一分散，所需处理的胶乳分散体通常需要在外加温控措施的条件下进行处理(例如需通过在冰浴条件下进行处理)，因为超声过程分散体系产生的热量将影响胶乳性能。另外，超声波细胞粉碎机大小固定，故处理胶乳分散体的体积十分有限，限制了生产规模和生产效率。并且，公知的是，超声过程中将产生一定的噪声，长期从事此工种人员容易造成职业疾病。最后，分散好后的胶乳分散体需过滤将未能完全分散的大颗粒胶乳进行去除，即会产生浪费，导致有效收率的下降。

另外，其他领域的一些公知技术中，公开了一些分散固体颗粒或粉末的方法，例如，在制造药物投递用分散体系领域，使用了剪切设备和匀化设备。

专利文献1中，公开了一种灵芝孢子油微胶囊粉的制备方法，通过三个步骤得到微胶囊粉。在第2步骤中，将壁材溶液在常压剪切机下剪切5min，转速为10000r/min～28000r/min，接着，采用高压均质机对乳液进行高压均质。其制备的微胶囊粉末流动性好，色泽美观，能够很好的保护灵芝孢子油中不饱和脂肪酸不被破坏，有效地提高了其氧化稳定性。

专利文献2中，公开了一种鸦胆子油纳米结构脂质载体及其冻干粉的制备方法，步骤为：(1)分别将油相和鸦胆子油在70℃下溶解，所述油相是指固态油脂或者固态油脂和液态油脂的混合，所述油相和鸦胆子油的质量比为：1:1～2:1；(2)取乳化剂溶解于超纯水中，70℃预热，乳化剂与超纯水的质量比为：1:200～1:800，乳化剂和鸦胆子油的质量比为：1:1.5～1:12；(3)将步骤(2)获得的水溶液与步骤(1)获得的油脂混合，采用高速剪切机剪切制成初乳；(4)将步骤(3)获得的初乳倒入高压均质机中，在50～70MPa压力下，循环5～7次，得到鸦胆子油纳米结构脂质载体。其鸦胆子油纳米脂质体提高了其载药量，具有较好的稳定性。