[发明专利]细梗香草药材的HPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

说明书

本发明公开一种细梗香草药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，所述方法包括以下步骤：(1)参照物溶液的制备：(2)供试品溶液的制备：(3)指纹图谱：(4)相似度评价：本发明方法简便、快速、准确、重现性好；为细梗香草材质量全面有效的控制提供了有力的保障。

技术领域

本发明涉及中药材的指纹图谱技术领域，尤其是细梗香草药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱。

背景技术

中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的图谱。它可以较全面地反映药材所含化学成分的种类和数量，有效地体现中药成分的整体性和综合作用，以其快速、准确等特点已被广泛运用于中药分析鉴定和质量控制等方面，是现阶段最有效的技术手段之一，也得到国际社会的认可。

细梗香草(Lysimachia capillipes Hemsl.)是报春花科(Primulaceae)珍珠菜属(Lysimachia)植物细梗香草的干燥全草，又名满山香、排香、香排草、香草、毛柄珍珠菜，其性甘，味平，归肝、胃、肾经。以全草入药，具有清热解毒、止咳、祛风之功效，用于感冒咳嗽、气管炎、哮喘、月经不调、神经衰弱的治疗。药材分布广泛，主产于福建、江西、湖南、贵州等地。

据文献报道，细梗香草药材中主要含黄酮、皂苷、挥发油和其他类成分，化学成分丰富且复杂。由于受气候、产地、采收季节等因素的影响，不同的细梗香草药材所含成分也存在较大差异。目前，细梗香草的质量控制研究较少且主要集中在单指标成分含量测定，这对细梗香草药材质量的控制就显得非常薄弱。本专利通过对11批次来源不同的细梗香草进行 HPLC指纹图谱研究，建立了细梗香草的指纹图谱，为该药材的质量控制提供了有力的保障。

发明内容

本发明所要解决的问题是提供一种细梗香草药材指纹图谱的建立方法及其指纹图谱，利用该图谱可监控细梗香草药材不同来源、不同采收季节细梗香草的主要成分的相对含量，用以鉴别其质量真伪。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：细梗香草药材指纹图谱的建立方法包括如下步骤：

(1)参照物溶液的制备

取槲皮素-3-O-(2”,6”-二-O-α-吡喃鼠李糖基)-β-半乳糖苷，山奈酚-3-O-[2-吡喃葡萄糖基(1→3)- 吡喃鼠李糖-6-吡喃鼠李糖]-β-D-吡喃半乳糖苷，山奈酚-3-O-{[β-D-吡喃葡萄糖基 (1→3)]-4-O-(E-p-香豆)}-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷-7-O-(4-O-乙酰基)-α-L-吡喃鼠李糖苷，山奈酚-3-O-{[β-D-吡喃木糖基(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→6)][α-L-吡喃鼠李糖 -(1→2)]}-β-D-3-反式-p-香豆酰基吡喃葡萄糖苷和细梗香草皂苷I对照品适量，混合，加入甲醇，得到参照物溶液。

(2)供试品溶液的制备：

取细梗香草全草药材提取，提取液经过滤即得；

(3)指纹图谱的制备：

取参照物溶液和多批次供试品溶液，注入高效液相色谱仪，得到色谱图，经过软件处理，得到标准对照指纹图谱，

其中色谱条件为：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相为乙腈-0.3％磷酸溶液系统，采用梯度洗脱方式。

其中，所述(1)参照物溶液的制备，步骤如下：

其中，所述(2)供试溶液的制备，步骤如下

取干燥的细梗香草全草药材适量，打粉，过3号筛，混匀，取约2.5g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入20％乙醇溶液25ml，加热回流1h，放冷，再称定重量，用20％乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

其中，所述(3)指纹图谱的制备，步骤如下