[发明专利]细梗香草药材的HPLC指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

权利要求书

1.一种细梗香草药材指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)参照物溶液的制备，取槲皮素-3-O-(2”,6”-二-O-α-吡喃鼠李糖基)-β-半乳糖苷，山奈酚-3-O-[2-吡喃葡萄糖基(1→3)-吡喃鼠李糖-6-吡喃鼠李糖]-β-D-吡喃半乳糖苷，山奈酚-3-O-{[β-D-吡喃葡萄糖基(1→3)]-4-O-(E-p-香豆)}-α-L-吡喃鼠李糖-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷-7-O-(4-O-乙酰基)-α-L-吡喃鼠李糖苷，山奈酚-3-O-{[β-D-吡喃木糖基(1→3)-α-L-吡喃鼠李糖(1→6)][α-L-吡喃鼠李糖-(1→2)]}-β-D-3-反式-p-香豆酰基吡喃葡萄糖苷和细梗香草皂苷I对照品，适量，加甲醇溶解配制成参照物溶液；

(2)供试溶液的制备，取干燥的细梗香草全草药材适量，打粉，过3号筛，混匀，取约2.5g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入20％乙醇溶液25ml，加热回流1h，放冷，再称定重量，用20％乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

(3)指纹图谱的制备，分别取参照物溶液和由不同批次细梗香草药材制备得到的供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录90min内的指纹图谱：

其中，色谱条件为：

采用YMC-Pack ODS-A色谱柱，4.6×150mm，5μm，流动相：乙腈-0.3％磷酸系统；采用梯度洗脱方式：0min→10min→90min，乙腈10％→15％→20％；检测波长：254nm；柱温：30℃；流速：1mL/min；分析时间：90min。

2.一种细梗香草全草药材检测方法，所述方法，步骤如下：

(1)供试溶液的制备，取干燥的细梗香草全草药材适量，打粉，过3号筛，混匀，取2.5g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入20％乙醇溶液25ml，加热回流1h，放冷，再称定重量，用20％乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；

(2)检测，取细梗香草药材制备得到的供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行高效液相色谱检测，记录90min内的指纹图谱：将所得的高效液相色图谱，和标准对照指纹图谱，进行对照，符合一致为合格产品；

其中，色谱条件为：

采用YMC-Pack ODS-A色谱柱，4.6×150mm，5μm，流动相：乙腈-0.3％磷酸系统；采用梯度洗脱方式：0min→10min→90min，乙腈10％→15％→20％；检测波长：254nm；柱温：30℃；流速：1mL/min；分析时间：90min。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述符合一致要求在90％以上。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述符合一致要求在95％以上。