[发明专利]一种测定烟草中氨基酸及Amadori化合物的HILIC色谱分析方法

说明书

本发明提供一种测定烟草中氨基酸及Amadori化合物的HILIC色谱分析方法，包括：将烟草样品进行萃取后获得的样品溶液，采用LC‑MS/MS进行检测，通过HILIC色谱柱分离氨基酸及Amadori化合物，根据各种氨基酸及Amadori化合物的保留时间、母离子及子离子的质荷比定性，标准曲线法定量，确定样品溶液中氨基酸及Amadori化合物的含量。本发明提供的一种测定烟草中氨基酸及Amadori化合物的HILIC色谱分析方法，能够同时对烟草中16种氨基酸及5种Amadori化合物进行定性定量分析，具有前处理过程简便、检测快速、分离度高、灵敏度高的优点。

技术领域

本发明属于烟草中化学成分分析的技术领域，涉及一种测定烟草中氨基酸及Amadori化合物的HILIC色谱分析方法，具体涉及烟草中16种氨基酸及5种Amadori化合物的HILIC色谱分析方法。

背景技术

氨基酸是烟叶中的重要化学成分，同时也是烟草中的一类重要致香物质。适量的氨基酸有助于提高烟气劲头和丰满度，但含量过高则会导致烟气辛辣、刺激性强。

在烟草调制、烘烤等过程中，氨基酸与还原糖之间可能发生一系列非酶促棕色化反应(美拉德反应)，对烟叶的品质及颜色都能够产生显著影响。Amadori化合物(Amadoriproducts:1-氨基-1-脱氧-2-酮糖类化合物)是美拉德反应的初级产物，也是重要的香味前体物质。对于烟草中氨基酸及Amadori化合物含量的分析，能够为卷烟配方、烟叶加料、醇化以及卷烟贮存等过程提供理论指导，并在评价烟草品质及卷烟质量方法提出监控方法。

目前，常见的检测方法大多是将氨基酸与Amadori化合物进行分别测定，主要采用液相色谱、离子色谱分离，以衍生后的紫外检测器、蒸发光散射检测器进行检测，或是经过衍生以气相色谱-质谱联用仪进行分析。以上这些方法存在前处理复杂、分辨率低、衍生化试剂不稳定等缺点。

因此，建立一种能够同时测定烟草中氨基酸及Amadori化合物的分析检测技术显得十分重要。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种测定烟草中氨基酸及Amadori化合物的HILIC色谱分析方法，用于解决现有技术中缺乏能够同时测定16种氨基酸及5种Amadori化合物的基于HILIC色谱的液相色谱-串联质谱联用方法的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种测定烟草中氨基酸及Amadori化合物的HILIC色谱分析方法，包括：将烟草样品进行萃取后获得的样品溶液，采用LC-MS/MS进行检测，通过HILIC色谱柱分离氨基酸及Amadori化合物，根据各种氨基酸及Amadori化合物的保留时间、母离子及子离子的质荷比定性，标准曲线法定量，确定样品溶液中氨基酸及Amadori化合物的含量。

优选地，所述氨基酸选自天冬氨酸(CAS号为56-84-8)、丙氨酸(CAS号为56-41-7)、缬氨酸(CAS号为72-18-4)、亮氨酸(CAS号为61-90-5)、异亮氨酸(CAS号为73-32-5)、丝氨酸(CAS号为56-45-1)、苏氨酸(CAS号为72-19-5)、酪氨酸(CAS号为60-18-4)、脯氨酸(CAS号为147-85-3)、精氨酸(CAS号为74-79-3)、组氨酸(CAS号为71-00-1)、谷氨酸(CAS号为56-86-0)、苯丙氨酸(CAS号为63-91-2)、赖氨酸(CAS号为56-87-1)、天门冬酰胺(CAS号为70-47-3)、谷氨酰胺(CAS号为56-85-9)中的一种或多种组合。

更优选地，所述氨基酸为16种，包括有天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、脯氨酸、精氨酸、组氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、天门冬酰胺、谷氨酰胺。