[发明专利]一种多功能靶向超声造影剂及其制备方法

权利要求书

1.一种多功能靶向超声造影剂，其特征在于，包括聚乳酸-羟基乙酸共聚物，其内填充氟碳气体形成聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球，在所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物中负载有苏丹黑染料，所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物的羧基端通过共价键偶联有抗人VEGFR-3单克隆抗体；所述多功能超声造影剂的微球粒径为1～2μm；所述聚乳酸-羟基乙酸共聚物中羧基和羟基的聚合比例为50︰50。

2.一种如权利要求1所述的多功能靶向超声造影剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将聚乳酸-羟基乙酸共聚物溶于二氯甲烷中，再加入苏丹黑，搅拌至完全溶解，得到混合液；

(2)在所述步骤(1)后得到的混合液中加入碳酸铵溶液，进行超声乳化得到初乳液，加入聚乙烯醇溶液，进行均质处理得到复乳液；

(3)在所述步骤(2)后得到的复乳液中加入异丙醇溶液，进行磁力搅拌，离心后取沉淀用双蒸水洗涤，真空冷冻干燥后，即得聚乳酸-羟基乙酸共聚物负载苏丹黑的非靶向超声造影剂；

(4)取所述步骤(3)后得到的非靶向超声造影剂分散溶解在MES缓冲液中，加入偶联活化剂EDC/NHS进行孵育，然后在MES缓冲液中进行离心，漂洗后去除未反应的EDC/NHS，得到高分子造影剂；MES缓冲液的pH为5.9～6.3，孵育的温度为0～4℃，孵育的时间为120～130min，离心速度为3000～5000rpm，漂洗次数为3～5次；EDC与NHS的质量比例是1︰3；所述EDC与非靶向超声造影剂的质量比例是1︰10；

(5)将所述步骤(4)后得到的高分子造影剂分散溶解在MES缓冲液中，加入抗人VEGFR-3单克隆抗体混匀进行孵育，然后在MES缓冲液中进行离心，漂洗后取沉淀进行真空冷冻干燥，再充入氟碳气体，即得到所述的多功能靶向超声造影剂；MES缓冲液的pH为7.9～8.3，孵育的温度为0～4℃，孵育的时间为60～70min，离心速度为3000～5000rpm，漂洗的次数为3～5次；所述抗人VEGFR-3单克隆抗体与所述高分子造影剂的质量比例是1︰2000。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，聚乳酸-羟基乙酸共聚物的质量与二氯甲烷的体积之比以mg/mL计为50︰1，所述步骤(1)中，苏丹黑的质量与二氯甲烷的体积之比以mg/mL计为2︰1。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，碳酸铵溶液的质量浓度为4％，碳酸铵溶液与二氯甲烷的体积之比为1︰10，超声乳化的功率为110W，超声乳化的时间为30～40s；聚乙烯醇溶液的质量浓度为4％，聚乙烯醇溶液与二氯甲烷溶剂的体积之比为5︰1，均质处理的转速为9000～10000rpm，均质处理的时间为5～8min。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中，异丙醇溶液的质量浓度为2％，异丙醇溶液与二氯甲烷溶剂的体积比为10︰1，磁力搅拌的时间为2～3h。

6.根据权利要求2～5中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)和/或步骤(5)中，真空冷冻干燥的温度为－80℃，真空冷冻干燥的时间为40～50h。