[发明专利]一种复合纳米脂质体及其应用

说明书

本发明提供了一种复合纳米脂质体及其应用。所述的复合纳米脂质体中包括：大豆卵磷脂、叶酸修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺‑聚乙二醇2000、胆固醇、光敏剂、化疗药和过氧化氢酶。该系统利用脂质体作为纳米载药系统，改善了药物的溶解度，降低了毒副作用，增加了对肿瘤部位的靶向性。本发明将光敏剂与抗癌药包裹在一起，通过细胞和活体抗肿瘤实验发现两种药物有很好的协同治疗效果；此外，负载过氧化氢酶，缓解了因光动力治疗而导致的肿瘤缺氧，增强了对肿瘤的抑制作用；并且，使用叶酸修饰的磷脂，实现对肿瘤的主动靶向，大大增强了抑瘤效果。

技术领域

本发明涉及脂质体的制备方法、化疗与光动力协同治疗，特别涉及一种具有多机制协同抗肿瘤活性的纳米脂质体的制备及应用。

技术背景

癌症仍是世界上难以攻克的难题，目前癌症的主要临床治疗手段之一的化疗和放疗。化疗作为一种传统的治疗方法在临床癌症治疗中仍得到广泛的应用，而阿霉素是临床常用的化疗药物，但由于阿霉素在肿瘤部位的富集能力差、对心脏严重的毒副作用和易产生耐药性等缺点限制了治疗的效果。

光动力治疗(Photodynamic Therapy，PDT)作为新兴的癌症治疗的手段之一，能够有效的实现对肿瘤的抑制作用。BODIPY类和菁染料类光敏剂具有许多特殊的理化性质，如：较大的摩尔消光系数和荧光量子产率，良好的热稳定性和光稳定性，并且通常还具有较好的光毒性和暗毒性。但此类化合物常常存在水溶性差，吸收率低，在病灶部位的富集量少，肿瘤内部缺氧等缺点，限制了其应用效果。因此，借助于纳米药物传递系统实现药物的病灶部位靶向递送、实现时间可控的药物释放是增加药物治疗功效，降低毒副作用的有效手段。因此，构建一种多功能的载药系统，探索多机制抗肿瘤物质的协同传递与应用，对肿瘤新型疗法的探索具有重要意义。

脂质体是由两亲性物质磷脂和其他两性化合物如胆固醇等分散到水相时形成的多层囊泡，自组装成脂质双分子层，疏水的尾部处于膜的中间，亲水的头部在内外表面层，形成亲水核心。囊泡内部为水相，通常作为包裹水溶性药物的场所；磷脂双分子层为疏水层，通常用于包裹脂溶性物质。脂质体具有很多优良的性质，如降低药物对非病灶部位的毒副作用、有效的提高药物的稳定性、增加药物在血液中的循环时间、实现药物的有效控制释放、具有很好的靶向性和生物相容性。基于此，以脂质体为主体，将不同类型的抗肿瘤分子进行协同传递与应用，是极有潜力的协同治疗新思路。

发明内容

本发明的目的即在于构建一种以脂质体作为纳米药物传递系统，将光动力治疗与传统的化疗联合在一起，并结合其它多种有效因素，达到增强协同抑制肿瘤的目的。

基于上述目的，本发明首先提供一种复合纳米脂质体，所述复合纳米脂质体中包括：大豆卵磷脂(SPC)、叶酸修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(FA- DSPE-mPEG2k)、胆固醇、光敏剂、化疗药和过氧化氢酶(Catalase)。

另一方面，本发明还提供上述复合纳米脂质体的制备方法，该方法包括如下步骤：

①将原料混合物溶于溶剂中，配制成质量浓度为3～10mg/ml的溶液；

所述的原料混合物使大豆卵磷脂(SPC)、叶酸修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(FA-DSPE-mPEG2k)、胆固醇、光敏剂和化疗药按照质量比80:10- 20:10-20:0.5-5:1-10的混合物；

所述的溶剂选自氯仿、乙醇或甲醇；

②将步骤①所得溶液中的溶剂蒸出，并干燥；然后加入磷酸缓冲溶液，反复冻融 3次；

③将步骤②的溶液匀质后过聚碳酸酯膜；

④向步骤③所得产物中加入过氧化氢酶，超声，过滤膜，得复合纳米脂质体。