[发明专利]一种纳豆激酶的生产菌株及其生产方法

权利要求书

1.一种纳豆枯草芽孢杆菌(Bacillus subtils natto)菌株，所述纳豆枯草芽孢杆菌菌株以CGMCC No.17895保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.一种生产纳豆激酶产品的方法，所述方法包括在培养基中培养根据权利要求1所述的纳豆枯草芽孢杆菌菌株以在所述培养基中产生纳豆激酶；

其中，所述培养基包含碳源物质和氮源物质，所述碳源物质为葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、果糖和甘油中的一种或更多种，所述氮源物质为酵母粉、蛋白胨、黄豆粉和鹰嘴豆粉中的一种或更多种；

所述培养基还包含促进微生物的生长和提高纳豆激酶的产率的有机物、无机物、或有机物和无机物的混合物，所述有机物为丝氨酸、甘氨酸、和丙氨酸中的一种或更多种，所述无机物为镁盐或钠盐。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述碳源物质与所述氮源物质的比为10:1～1:2。

4.根据权利要求2所述的方法，其中，所述无机物为硫酸镁、氯化镁、氯化钠中的一种或更多种。

5.根据权利要求2-4中任一项所述的方法，其中培养在35-45℃进行。

6.根据权利要求5中所述的方法，其中培养在37-40℃进行。

7.根据权利要求2-4中任一项所述的方法，其中培养持续10-48小时。

8.根据权利要求7所述的方法，其中培养持续12-24小时。

9.根据权利要求2-4中任一项所述的方法，所述方法包括在发酵过程中补加碳源物质或氮源物质，或碳源物质和氮源物质的混合物。

10.根据权利要求2-4中任一项所述的方法，所述方法还包括以下步骤：

(1)固液分离，以分离菌体和上清液；

(2)用超滤膜分离，得到纳豆激酶浓缩液，所述超滤膜的分子量范围在1000-50000D之间；

(3)用1mmol/L的等渗NaCl溶液洗涤，使所述纳豆激酶浓缩液的电导率≤300μs/cm；

(4)干燥，所述干燥为喷雾干燥、冷冻干燥或真空干燥。

11.根据权利要求10所述的方法，在步骤(2)中，所述超滤膜的分子量范围在10000～30000D之间。

12.根据权利要求10所述的方法，在步骤(3)中，使所述纳豆激酶浓缩液的电导率≤200μs/cm。

13.根据权利要求10所述的方法，在步骤(3)中，使所述纳豆激酶浓缩液的电导率≤100μs/cm。

14.根据权利要求10所述的方法，其中固液分离使用陶瓷膜分离或离心进行。

15.根据权利要求10所述的方法，其中所述干燥步骤中加入保护剂，所述保护剂为大豆蛋白粉、胶原蛋白粉、膳食纤维、微晶纤维素、玉米淀粉或者其组合物。

16.根据权利要求15所述的方法，所述保护剂为5％-25％的大豆蛋白粉和2.5％-12.5％膳食纤维。