[发明专利]利用HPLC检测硫酸氢氯吡格雷片溶出度的方法

说明书

本发明提供一种利用HPLC检测硫酸氢氯吡格雷片溶出度的方法，包括以下步骤：标准溶液的配制、标准曲线的绘制、硫酸氢氯吡格雷片供试品溶液的制备、供试品溶液的测定，通过峰面积及标准曲线计算出供试品溶液中硫酸氢氯吡格雷的浓度，然后计算出硫酸氢氯吡格雷片的溶出度；其中，所用的溶出介质均为含0.1‑0.3％吐温80的pH4.5醋酸缓冲液。本发明的方法可以克服空白介质的吸光度不稳定的问题，而且该方法的溶出介质含吐温80，在避免使用有机溶剂的同时增加硫酸氢氯吡格雷的溶解度，同时经过对该方法的一系列验证，其专属性强、结果准确、稳定性好，可以准确地测定硫酸氢氯吡格雷片在pH4.5溶出介质中的溶出度。

技术领域

本发明涉及硫酸氢氯吡格雷片溶出度测定技术领域，具体涉及利用HPLC检测硫酸氢氯吡格雷片溶出度的方法。

背景技术

硫酸氢氯吡格雷片是由法国赛诺菲公司开发的一种血小板聚集抑制剂，于1997年首次经FDA批准上市。硫酸氢氯吡格雷片的主要成分为硫酸氢氯吡格雷，其能选择性地抑制ADP与血小板受体的结合，随后抑制激活ADP与糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物，从而抑制血小板的聚集，主要用于预防和治疗因血小板高聚集状态引起的心、脑及其它动脉的循环障碍疾病。中国药典2015版中采用紫外分光光度法测定，但在做一致性评价的过程中，按照中国药典的方法配置的pH4.5溶出介质，采用药典中紫外分光光度法在240nm条件测定时，空白介质的吸光度一直不稳定，导致无法准确测定各个取样点的溶出度。

发明内容

针对中国药典提供的紫外分光光度测定硫酸氢氯吡格雷片溶出度存在的技术问题，本发明提供一种利用HPLC检测硫酸氢氯吡格雷片溶出度的方法，该方法可以克服空白介质的吸光度不稳定的问题，而且该方法的溶出介质含吐温80，在避免使用有机溶剂的同时增加硫酸氢氯吡格雷的溶解度，同时经过对该方法的一系列验证，其专属性强、结果准确、稳定性好，可以准确地测定硫酸氢氯吡格雷片在pH4.5溶出介质中的溶出度。

本发明所提供的技术方案具体如下：

一种利用HPLC检测硫酸氢氯吡格雷片溶出度的方法，包括以下步骤：

（1）标准溶液的配制：取硫酸氢氯吡格雷标准品加甲醇溶解后，再用溶出介质依次稀释并分别配制成一系列浓度梯度的标准溶液；

（2）标准曲线的绘制：将步骤（1）所配制的标准溶液分别进行HPLC检测，设定检测条件，根据峰面积与标准溶液浓度的对应关系分别建立标准曲线；

（3）硫酸氢氯吡格雷片供试品溶液的制备：按照中国药典2015版4部通则0931第二法依法操作，取硫酸氢氯吡格雷片置于溶出介质中，转速为每分钟50转，分别于5-60min的时间内选择各时间点取液并用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；

（4）供试品溶液的测定：将步骤（3）所制备的供试品溶液分别进行HPLC检测，设定检测条件，再分别通过峰面积及标准曲线计算出供试品溶液中硫酸氢氯吡格雷的浓度，然后计算出硫酸氢氯吡格雷片的溶出度；

其中，步骤（1）和步骤（3）中所用的溶出介质均为含0.1-0.3％吐温80的pH4.5醋酸缓冲液。

优选地，步骤（2）和步骤（4）的HPLC检测条件如下：色谱柱为卵黏蛋白键合硅胶手性色谱柱；流动相为体积比为75-82:25-18的0.01mol/L磷酸二氢钾溶液和乙腈的混合溶液，柱温20-30℃；检测波长240nm；流速0.8-1.0mL/min。

优选地，所述0.01mol/L磷酸二氢钾溶液和乙腈的体积比为80:20。

优选地，所述柱温为25℃。

优选地，所述流速为1.0mL/min。

优选地，所述pH4.5醋酸缓冲液含吐温80的重量比为0.2%。