[发明专利]一种检测水产品中呋喃苯烯酸钠残留量的方法

说明书

本发明公开了一种检测水产品中呋喃苯烯酸钠残留量的方法，样品采用甲酸水分散，以叔丁基羟基茴香醚作为保护剂，用乙腈提取，经亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白，正己烷和C18柱净化，碱性条件下减压浓缩后，用液相色谱‑串联质谱仪进行测定，对样品中呋喃苯烯酸钠残留量进行定性和定量分析。

技术领域

本发明属于水产品检测技术领域，是一种用高效液相色谱-串联质谱法(LC/ESI-MS/MS)测定水产品中呋喃苯烯酸钠残留量的方法。

背景技术

呋喃苯烯酸钠属于人工合成的呋喃类抗菌药物，主要运用在动物和鱼类的细菌预防和治疗中。但是，世界卫生组织和联合国粮农组织联合报道硝基呋喃类药物具有潜在的致突变和致癌性。为了保护消费者的健康,世界各国政府纷纷禁止了硝基呋喃类药物在食品动物上所有目的的使用。我国在农业部235号公告中属于禁止使用的药物，在动物性食品中不得检出。

目前,关于呋喃苯烯酸钠检测方法的研究报道很少,仅见于饲料、猪肉、鸡肉、乳制品以及鱼血清等的检测，国内对于海产品中呋喃苯烯酸钠的检测标准很少且检出限很高，不能满足进出口贸易中各国对呋喃苯烯酸钠残留限量要求。

发明内容

本发明提供了一种检测水产品中呋喃苯烯酸钠残留量的方法，以解决水产品中呋喃苯烯酸钠残留量检出限高的问题。

本发明提供了一种检测水产品中呋喃苯烯酸钠残留量的方法，样品采用甲酸水分散，以叔丁基羟基茴香醚作为保护剂，用乙腈提取，经亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白，正己烷和C18柱净化，碱性条件下减压浓缩后，用液相色谱-串联质谱仪进行测定，对样品中呋喃苯烯酸钠残留量进行定性和定量分析。

优选地，包括以下步骤：

(1)以呋喃苯烯酸钠标准物质配制标准储备液，以50％甲醇水溶液将标准储备液稀释成不同浓度梯度的标准工作溶液。

(2)在水产品样品中加入1％甲酸水分散混合，加入乙腈提取，以叔丁基羟基茴香醚作为抗氧化剂进行保护，超声波萃取，得到样品提取物；在水产品样品中加入并加入不同浓度梯度的标准工作溶液后，再加入1％甲酸水分散混合，加入乙腈提取，以叔丁基羟基茴香醚作为抗氧化剂进行保护，超声波萃取，得到加标提取物。

(3)在样品提取物和加标提取物中均加入亚铁氰化钾和乙酸锌去除蛋白后，再加入氯化钠进行液液分配。取上层有机相并加入同等量的水，加入正己烷去除油脂后，取下层至固相萃取仪中，使用C18柱作为固相萃取柱，以50％乙腈水洗脱接收，洗脱液加入氯化钠液液分配，加入氨水后，减压浓缩，用50％甲醇水溶液定容，过0.22μm PTFE微孔滤膜后，得到样品提取溶液和加标提取溶液。

(4)将标准工作溶液进LC/ESI-MS/MS中分析，绘制标准曲线。

(5)将样品提取溶液和样品加标溶液进LC/ESI-MS/MS中分析，进行定性和定量测定。

优选地，色谱条件为：

色谱柱：C18柱，50×2.1mm，1.8μm，或性能相当者。

流速：0.4mL/min。

柱温：35℃。

进样量：3μL。

梯度洗脱：流动相A为含5.0mmol/L醋酸铵的0.1％甲酸溶液，流动相B为乙腈。

可选地，质谱条件为：

离子化模式：电喷雾离子源ESI，负离子模式。

干燥器温度：300℃。

干燥器流速：8L/min。

鞘气温度：350℃。

鞘气流速：11L/min。