[发明专利]一种利用本土化土壤试验动物评估重金属污染土壤生态毒性的方法

说明书

本发明公开了一种利用本土化土壤试验动物评估重金属污染土壤生态毒性的方法。该方法为：选用球肾白线蚓作为试验动物；正式试验前，先进行预试验：在不同重金属浓度处理组的土壤中放入一定数量的球肾白线蚓，控制土壤含水量30‑45％，置于温度15‑25℃、湿度70‑80％、光照的人工气候箱中预试验；参考预试验结果确定的最低致死浓度，设置正式试验的重金属暴露浓度；各浓度处理组放入与预试验相同数量的球肾白线蚓，记录各浓度处理组球肾白线蚓暴露一定时间后的生存状况并计算LD₅₀值。该方法选用球肾白线蚓为试验动物评估重金属污染土壤生态毒性，量化了试验过程中的各项参数，便于开展试验，且操作简便易行，耗时短，灵敏度高。

技术领域

本发明属于污染土壤生态毒性评估技术领域，涉及一种利用本土化土壤试验动物球肾白线蚓评估重金属污染土壤生态毒性的方法。

背景技术

土壤是人类赖以生存的重要自然环境，随着工业的快速发展，土壤的重金属污染问题日益突出，土壤污染修复日益受到重视。研究灵敏的污染土壤生态毒性评估方法对评价污染土壤以及修复后的生态环境具有重要意义。

目前，有关土壤重金属污染的评估方法报道主要是物理或化学方法评估土壤中重金属的总量，并制定了限值，有关生态毒性评估的报道较少，此外，邱江平等报道了利用蚯蚓评估污染土壤的生态毒性效应具有一定的环境、经济与社会效益。但现有的这些土壤生态毒性评估方法存在操作周期长，重现性差和灵敏度较低的弊端。

发明内容

本发明的目的在于：克服现有技术的不足，提供一种操作周期短、重现性好、灵敏度高的土壤生态毒性评估方法，即一种利用本土化土壤试验动物(球肾白线蚓)评估重金属污染土壤生态毒性的方法。该方法利用球肾白线蚓对土壤中重金属生态毒性的敏感性，可应用于对污染土壤的生态毒性评估。

本发明的技术方案如下：

一种利用本土化土壤试验动物评估污染土壤生态毒性的方法如下：选用一种白线蚓即球肾白线蚓(Fridericia bulbosa)作为试验动物，对重金属污染土壤进行重金属的生态毒性效应试验；试验用白线蚓先预养一段时间，然后选择具有环带的健壮成体进行试验；正式试验前，先进行预试验；预试验方法是：在不同重金属浓度的土壤中放入一定数量比例的球肾白线蚓，控制土壤含水量在30-45％；然后置于温度15-25℃、湿度70-80％、光照的人工气候箱中进行预试验，确定最低致死浓度；参考预试验结果确定的最低致死浓度，设置正式试验的各浓度处理组的重金属暴露浓度，同时设置去离子水试验组作为对照；设置试验期间人工土壤的平均含水率在30％～45％之间；每组试验各设多个重复试验；各浓度处理组的每个重复试验中放入与预试验相同数量比例的球肾白线蚓，记录各浓度处理组的球肾白线蚓在暴露一定时间后的生存状况，并计算LD₅₀值(半数致死剂量)。

优选方案，一种利用本土化土壤试验动物球肾白线蚓评估污染土壤生态毒性的方法，具体按如下步骤实施：

(1)试验动物(球肾白线蚓)的选取

选用一种白线蚓即球肾白线蚓蚓作为试验动物，对重金属污染土壤进行重金属的生态毒性效应试验；试验用白线蚓先预养一段时间，然后选择平均重量为1.0-1.5mg具有环带的健壮成体进行试验。

(2)预试验

正式试验前，进行预试验：将一定量不同浓度的重金属去离子水溶液与一定量的人工土壤(其中，泥炭藓5-15％、高岭黏土15-25％、石英砂60-80％)置于容器中混合均匀，使土壤中重金属浓度在0.1-1000mg/kg土壤干重，使土壤含水量达到30％～45％；各浓度处理组的每个试验中放入一定数量比例的球肾白线蚓；为防止水分蒸发，用薄膜封住容器口，扎孔透气；然后置于人工气候箱中进行预试验，温度设定为18-22℃，湿度为72-78％，24h光照；(预试验的暴露时间一般为3-4d)；记录各浓度处理组的球肾白线蚓的生存状况，确定最低致死浓度。