[发明专利]一种精品肝素钠的制备工艺

说明书

本发明公开了一种精品肝素钠的制备工艺，包括以下步骤：将粗品肝素钠加水溶解制得粗品肝素钠水溶液，在粗品肝素钠水溶液中加入复合蛋白沉淀剂进行蛋白沉淀，静置20‑40分钟后将沉淀物分离出；对分离了沉淀物后的粗品肝素钠水溶液进行过滤、降温，在粗品肝素钠水溶液中加入乙醇直至沉淀物析出离心甩干，获得肝素钠湿品；对肝素钠湿品进行干燥，获得肝素钠次精品；将肝素钠次精品加水溶解，在肝素钠次精品溶液中加入蛋白质复合酶制剂，离心、过滤获得肝素钠次精品清液；将肝素钠次精品清液用动态吸附树脂循环吸附，对树脂进行洗脱，在洗脱液中加入乙醇，过滤、降温干燥得到精品肝素钠。本发明提高了精品肝素钠的产率。

技术领域

本发明涉及一种肝素钠制备工艺，具体涉及一种精品肝素钠的制备工艺。

背景技术

肝素钠是一种粘多糖硫酸基抗凝血药，在临床使用中广泛用于防治各种心脑血管疾病，一直是最有效的抗凝血药物，特别是对动静脉血栓、血塞具有独特疗效。肝素钠广泛存在于哺乳动物的肠粘膜、肺、肝中，特别是猪小肠粘膜中含量最高，并且从健康生猪小肠粘膜中提取出来的肝素与人体内的肝素分子结构基本一致。现有技术中肝素钠的生产方法，主要采用新鲜猪小肠粘膜为原料，通过清洗处理，酶解提取，树脂吸附、洗脱，醇沉和烘干得到肝素钠粗品。

传统的生产工艺方法是将粗品肝素钠进行一次或两次氧化脱色及乙醇沉淀精制，其过氧化氢用量大(3-5％)，对肝素钠效价损伤大，收率低。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是通过氧化脱色对肝素钠进行精制，收率低，目的在于提供一种精品肝素钠的制备工艺，解决传统工艺通过氧化脱色对肝素钠进行精制，收率低的问题。

本发明通过下述技术方案实现：

一种精品肝素钠的制备工艺，包括以下步骤：

S1、将粗品肝素钠加水溶解制得粗品肝素钠水溶液，在粗品肝素钠水溶液中加入复合蛋白沉淀剂进行蛋白沉淀，静置20-40分钟后将沉淀物分离出；

S2、对步骤S1中分离了沉淀物后的粗品肝素钠水溶液进行过滤、降温，降低至10-15℃，在10-15℃的粗品肝素钠水溶液中加入85-95％的乙醇直至沉淀物析出，静置12-24小时，离心甩干，获得肝素钠湿品；

S3、在30-35℃下对肝素钠湿品进行干燥，获得肝素钠次精品；

S4、将肝素钠次精品加水溶解，调节溶液pH至8-9，在肝素钠次精品溶液中加入蛋白质复合酶制剂，离心、过滤获得肝素钠次精品清液；

S5、将肝素钠次精品清液用动态吸附树脂循环吸附3-5次后，对树脂进行洗脱，在洗脱液中加入温度为10℃的乙醇，直至沉淀物析出，沉淀物析出4-8小时后，溶液在50-60℃下静置30-60分钟后过滤、降温干燥得到精品肝素钠。

本发明分别利用沉淀法及酶解法对粗品肝素钠进行提纯，操作简单，不需要对肝素钠进行氧化，不会破坏肝素钠的结构，提纯效率高；

本发明利用乙醇对肝素钠进行沉淀，肝素钠溶液中加入乙醇后，肝素钠析出，多余的蛋白沉淀剂及蛋白质复合酶制剂不会影响肝素钠的析出，乙醇蒸发后能够提取多余的蛋白沉淀剂及蛋白质复合酶制剂，节约能源。本发明在使用乙醇沉淀肝素钠时，降低了乙醇及肝素钠溶液的温度，一方面能够防止乙醇挥发，另一方面有效减少肝素钠结成固体颗粒过程中对乙醇等有机溶剂的“包裹”和“共沉淀”；本发明酶解条件温和，在裂解核酸及蛋白杂质的同时，可有效保护肝素钠较少受蛋白酶的破坏。本发明精品肝素钠的产率高达90％，精品肝素钠的纯度高达95％。本发明在无盐条件下实现肝素钠的酶解和吸附过程，从而使排放的废水中盐浓度降低，减少废水处理成本，提高环境效益。

所述复合蛋白沉淀剂包括以下重量份数的组分：10-15份5-磺基水杨酸、3-8份三氯乙酸、2-6份乙腈、5-10份乙酸乙酯、10-20份聚丙烯酸、0.8-5份醋酸钠缓冲液。