[发明专利]一种壳聚糖酶CsnT及其应用

说明书

本发明涉及一种壳聚糖酶CsnT及其应用。所述内切壳聚糖酶CsnT氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供一种壳聚糖酶CsnT的发酵和纯化方法，发酵液酶活力高达796.3 U/mL，一步纯化纯度95%，回收率为88.9%。本发明所述壳聚糖酶CsnT性质稳定，在50℃孵育1 h可保持52.4%的酶活力，降解主产物壳二糖和壳三糖，具有良好的工业化应用潜质。

技术领域

本发明涉及一种壳聚糖酶CsnT及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

壳寡糖被誉为“生命的第六元素”，具有广泛的抑菌、抗炎、抗肿瘤作用，被公认为有效的保健功能食品。壳寡糖由N-乙酰-D-氨基葡萄糖（GLcNAc）和D-氨基葡萄糖（GLcN）通过β-l,4-糖苷键连接而成，极易溶于水，在医药、保健品、功能食品等领域比大分子壳聚糖有更大的应用价值。

利用壳聚糖酶生物酶法降解大分子壳聚糖具有反应条件温和、降解产物单一、反应过程容易控制、环境友好等优势，逐渐成为壳寡糖制备过程中的主流方法。但是，目前市场上销售的壳聚糖酶价格昂贵、活力较低，且稳定性较差，严重限制了壳聚糖酶的应用前景。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种壳聚糖酶CsnT及其制备方法。本发明所述壳聚糖酶CsnT产量高达796.3 U/mL, 最适反应温度为50 ℃，在40 ℃孵育1 h可保持65.5%的酶活力，在50 ℃孵育1 h可保持52.4%的酶活力。降解主产物为壳二糖和壳三糖。本发明所述壳聚糖酶CsnT产量高、制备方法简单、纯度高、稳定性好，具有良好的工业化应用潜质。

一方面，本发明提供一种壳聚糖酶CsnT，其氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。

SEQ ID NO.1：

SKLVSGAPVPNLRTRTVAVAVGGVHKLIASGAIAGTAAQANAVSSLAPAITAVSAASTGDLSAPAKKEIAMQLVCSAENSSLDWKAQYGSGTGDMLELVQNYANTKPDYIEDIDEDRGYTGGIIGFTNNVLKPFLPVLRKVNGTKSHEGLGQKYVDAWHQAAKDSVFLKEQDKVRDSMYFNPRKVSQGKSDGLSNLGQFMYYDAIFMHGPGDSSDSFGGIRKSAMKNAKTPAQGGDEKTYLQAFATARKKIMKQENAHSDTSRVRTVDAQLKFLNEGNYDLHTPLKWKVYGDPYEIK

另一方面，本发明还提供一种壳聚糖酶CsnT对应的核酸序列，如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.2：