[发明专利]一种选择性定量检测碘离子的方法及应用

说明书

本发明公开一种选择性定量检测碘离子的方法，步骤一、在HEPES缓冲液中制备固定浓度季铵盐缓冲溶液，然后将浓度分布在0.0–700.0μM范围内的不同浓度的碘离子溶液分别加入到季铵盐缓冲溶液生成四苯基碘化鏻微晶；步骤二、制得线性拟合获得磷光发光强度和碘离子浓度标准线图；步骤三、将待测碘离子浓度溶液加入至含有固定浓度季铵盐缓冲溶液中，搅拌，测定混合物的磷光发光强度，根据步骤二获得的标准线图获得待测溶液中碘离子的浓度；本发明还公开了一种使用季铵盐在生物体活细胞中进行成像或者是碘离子检测的应用以及碘离子特异性检测试纸条；该发明定量检测碘离子，灵敏度高和选择性良好。

技术领域

本发明涉及定量检测碘离子的技术领域，特别是涉及一种选择性定量检测碘离子的方法及应用。

背景技术

碘是一种重要的微量营养素，它与甲状腺的神经发育及其正常功能密切相关，碘含量的异常变化会引起甲状腺方面的疾病。因此，生物体内碘离子特异性的检测对相关疾病的诊断，早期预防，病理分析以及实际的临床应用都有非常重要的理论意义和实际应用价值，迫切需要发展有效灵敏的检测方法来定量检测生物体内的碘离子。碘的灵敏检测长期依赖于具有特定电荷转移性质的蓝色或紫蓝色淀粉碘络合物的显色反应，因此在碘化物样品的检测之前需要将碘离子转化为单质碘，其在实际应用及快速检验试纸条的构建中有很大的局限性。其中基于发光开启方式的选择性分子探针是高效灵敏地检测生物活性物种的非常有效且便捷的方法。然而，由于碘的特殊的重原子效应，使得以发光开启的方式检测碘离子的选择性分子探针的构建非常困难，目前还鲜有报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种选择性定量检测碘离子的方法，该发明利用水溶性季铵盐作为探针，将碘离子引入探针溶液中，产生大量的具有明亮蓝色发射的四苯基碘化鏻微晶，随碘离子浓度的增加，磷光逐渐增强，用于定量检测碘离子；该方法具有高灵敏度和良好选择性。

为解决此技术问题，本发明的技术方案是：一种选择性定量检测碘离子的方法，包括以下步骤：

步骤一、在HEPES缓冲液中制备固定浓度季铵盐缓冲溶液，然后将浓度分布在0.0–700.0μM范围内的不同浓度的碘离子溶液分别加入到季铵盐缓冲溶液生成四苯基碘化鏻微晶；

步骤二、记录生成有四苯基碘化鏻微晶的缓冲溶液用氙弧灯在380nm条件下激发获得不同碘离子浓度对应的磷光发光光谱，经过线性拟合获得磷光发光强度和碘离子浓度标准线图；

步骤三、将待测碘离子浓度溶液加入至含有固定浓度季铵盐缓冲溶液中，搅拌，测定混合物的磷光发光强度，根据步骤二获得的标准线图获得待测溶液中碘离子的浓度。

优选所述季铵盐为四苯基氯化鏻、苄基三苯基氯化鏻或者甲基三苯基氯化鏻中的一种。

优选检测下限为2.3μg。根据步骤二制得的标准线图，碘离子的含量与所观察到的磷光强度成正比，检测限可以低至2.3μg，检测的灵敏度较高。

本发明的目的在于提供一种针对碘离子的时间门控检测方法，该发明利用碘离子触发的有机磷光晶体的明亮磷光使得能够以时间门控的方式实现碘离子的高度特异性测定，以避免复杂基质的自体荧光干扰。

为解决此技术问题，本发明的技术方案是：一种针对碘离子的时间门控检测方法，包括以下步骤：

步骤一、在HEPES缓冲液中制备固定浓度季铵盐缓冲溶液，然后将浓度分布在0.0–700.0μM范围内的不同浓度的碘离子溶液分别加入到季铵盐缓冲溶液生成四苯基碘化鏻微晶；

步骤二、记录生成有四苯基碘化鏻微晶的缓冲溶液用μF2微秒闪光激发获得的延迟时间的磷光发光光谱，经过线性拟合获得磷光发光强度和碘离子浓度标准线图；

步骤三、将待测碘离子浓度溶液加入至含有固定浓度季铵盐缓冲溶液中，搅拌，测定混合物的磷光发光强度，根据步骤二获得的标准线图获得待测溶液中碘离子的浓度。