[发明专利]电化学发光免疫测定方法及试剂盒

权利要求书

1.一种电化学发光免疫测定方法，具体步骤包括：

步骤1：将样本、生物素化合皮质醇特异性抗体和吡啶钌标记的皮质醇衍生物充分反应，得到预反应复合物；

步骤2：向所述预反应复合物中加入包被链霉亲和素的磁珠微粒进行孵育，通过所述生物素化合皮质醇特异性抗体与链霉亲和素的相互作用，将所述预反应复合物结合到所述磁珠微粒上，得到抗原抗体磁性微粒复合体；

步骤3：将所述抗原抗体磁性微粒复合体吸入到测量池中并向所述测量池中加入三丙胺，加电压发生ECL 反应，使所述抗原抗体磁性微粒复合体化学发光，然后通过光电倍增器测量发光强度，从而得出皮质醇的浓度。

2.根据权利要求1所述的电化学发光免疫测定方法，其特征在于，它还包括配制梯度浓度的标准溶液，根据发光强度变化值对数与浓度对数绘制剂量反应曲线，通过换算得出样本中的皮质醇的浓度。

3.根据权利要求2所述的电化学发光免疫测定方法，其特征在于，所述样本为血清、尿液或组织液。

4.根据权利要求2或3所述的电化学发光免疫测定方法，其特征在于，所述样本为有机化合物、核苷酸、核糖核酸、脱氧核糖核酸、单糖、多糖、氨基酸、多肽或蛋白质。

5.根据权利要求4所述的电化学发光免疫测定方法，其特征在于，所述吡啶钌标记的皮质醇衍生物为4-二丙氨基丁基-4’-甲基-2,2’-联吡啶、4-4’-二(二丙氨基丁基)-2,2’-联吡啶或4-乙醇氨基丁基-2,2’-联吡啶。

6.一种用于电化学发光免疫测定的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括二价三联吡啶钌标记的皮质醇肽段、生物素化合抗皮质醇抗体、链霉亲和素包被的磁性微粒、三丙胺溶液；其中，所述包被链霉亲和素的磁珠微粒由浓度为0.72mg/mL的包被链霉亲和素的磁珠微粒和防腐剂组成；所述生物素化合抗皮质醇抗体由防腐剂、浓度为90ng/mL的生物素化抗皮质醇多克隆抗体和浓度为100mmol/L的MESb缓冲液组成；所述二价三联吡啶钌标记的皮质醇肽段是由防腐剂、浓度为25 ng/mL的吡啶钌标记的皮质醇衍生物、浓度为20μg /mL 达那唑和浓度为100mmol/L的MES缓冲液组成，所述吡啶钌标记的皮质醇衍生物为4-二丙氨基丁基-4’-甲基-2,2’-联吡啶、4-4’-二(二丙氨基丁基)-2,2’-联吡啶或4-乙醇氨基丁基-2,2’-联吡啶。