[发明专利]一种肼的零背景荧光检测方法及其应用

说明书

本发明公开了一种肼的零背景荧光检测方法及其应用，本发明通过十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)胶束促进4‑二乙氨基水杨醛与肼之间的缩合反应，原位生成的具有分子内氢键的荧光物质作为肼的指示剂，提出了一种肼检测的新方法。该方法构建了零背景的检测模式，并避免了实验期间繁琐的有机合成和有机溶剂的使用。此外，在实际水样、血清样本，活细胞甚至小鼠成像在内的广泛研究表明，探针4‑二乙氨基水杨醛(DEASA)和原位传感方案在灵敏度、抗干扰能力和成像方面具有良好的稳定性和广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于肼检测技术领域，涉及一种用于检测肼的方法策略。更具体地，涉及一种肼的零背景荧光检测方法及其应用。

背景技术

众所周知，肼是一种广泛使用的火箭推进剂，由于其固有的强碱性和还原性，在工业领域中应用广泛，主要用于制造化学催化剂，医药中间体和农用化学品。然而，世界卫生组织将肼定义为生产和运输过程中的具有剧毒性和致癌性的环境污染物，并且阈值限值定为10ppb。此外，肼的水溶性极佳，易通过口腔和皮肤接触吸收，对肾脏、肺脏、肝脏甚至中枢神经系统等人体器官造成严重的损害。因此，对于肼的检测，监测其痕量浓度是十分重要的，从而满足在水溶液中高灵敏度和具有良好传感性能的需求。

目前，肼的检测的常用分析方法主要有电化学分析、HPLC/GS-MS方法和毛细管电泳，但这些方法通常需要在高成本的实验仪器上进行，样品制备繁琐，并且与荧光探针相比，不适用于生物系统中的分析。

荧光探针作为一种在对目标物的传感中具有特殊光学特性的化合物，其能够满足日益增长的解决环境污染和人类健康问题的需求，并且荧光探针在灵敏度和选择性方面取得了很大进步。迄今已开发出一系列适用于实际样品、活细胞甚至生物体的荧光探针，这些探针简单易行，可用于标记或生物成像，使它们在疾病的早期诊断和环境污染检测方面具有巨大潜力。

此外，为了提高荧光探针的分析灵敏度和信噪比，虽然目前文献报道中，已经有多种方法设计和构建分子结构来提高响应信号或减少背景干扰。例如，通过扭曲的分子内电荷转移(TICT)、荧光共振能量转移(FRET)和光致电子转移(PET)等光物理过程设计探针结构。但是使用探针和分析物原位生成发色团的分析方法可以完全避免背景荧光的干扰，并且该类探针通常具有巧妙的分子结构，其本身是不发光的，与分析物结合可自行产生发光体实现对分析物的检测，以及简单的分子结构可有效地避免繁琐的合成及纯化过程，其是目前比较具有应用价值的水中肼检测方法，通过探针和目标分析物之间的特定反应生成发色团的分析方法，为实现目标物的高灵敏度零背景检测提供了一种新思路。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是针对现有技术中存在的问题，提供一种CTAB胶束促进4-二乙氨基水杨醛与肼的缩合反应，原位生成的发色团作为肼检测指示剂的新型传感策略。

为了实现上述目的，本发明的技术方案如下：

一种肼的零背景荧光检测方法，通过十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)胶束促进4-二乙氨基水杨醛与分析物肼之间的缩合反应，原位生成的具有分子内氢键的新生色团作为肼检测的指示剂。

本发明通过4-二乙氨基水杨醛(DEASA)在CTAB胶束中与肼的缩合反应，原位生成的新生色团作为肼检测的荧光指示剂，实现了水相中肼的零背景检测，避免了繁琐的有机合成及有机溶剂的使用。

上述公开的具体检测方法，包括如下步骤：

步骤一：在比色管中加入PBS缓冲液作为溶剂；

步骤二：向步骤一的溶剂中加入探针DEASA和特定浓度的CTAB。

步骤三：向步骤二的溶液中加入分析物肼，DEASA与肼发生缩合反应，生成发光物质HDBM。

需要说明的是，上述缩合反应的反应温度为室温，反应迅速。

优选的，所述新生色团的合成方法具体包括如下步骤：