[发明专利]花生油中黄曲霉毒素的前处理方法及检测方法

权利要求书

1.一种花生油中黄曲霉毒素的前处理方法，其特征在于：包括如下步骤：

称取待测花生油样品，向花生油样品中加入甲醇、丙酮和甲酸的混合水溶液，甲醇、丙酮、甲酸和水的摩尔比为3-5:8-10:0.1-0.3:10-15，花生油样品与混合水溶液的体积比为1:2-4；

搅拌混合设定时间后，油水分离，向水相中加入水稀释，得到稀释液；

向稀释液中加入适量氢氧化钠，调节溶液的pH值为中性，向其中加入固相萃取剂进行搅拌萃取；

固液分离，对固相萃取剂进行洗脱附，过滤后，得到待检测的样品溶液；

其中，所述固相萃取剂包括活性炭颗粒和包覆于活性炭颗粒表面的包覆层，包覆层中包括有机酸、Cu²⁺或Fe³⁺，有机酸为蓖麻油酸、棕榈油酸或正葵酸。

2.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于：甲醇、丙酮、甲酸和水的摩尔比为3-4:8-9:0.1-0.2:10-12，花生油样品与混合水溶液的体积比为1:2-3。

3.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于：搅拌萃取的时间为5-10min，搅拌的温度为55-60℃。

4.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于：向水相中加入水稀释，水相的稀释倍数为30-40倍。

5.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于：所述固相萃取剂的制备方法，包括如下步骤：

称取活性炭，向活性炭中加入质量分数为0.01-0.05％的KOH溶液中，70-80℃的条件下进行活性炭的改性，得改性后的活性炭；

将改性后的活性炭过滤、洗涤，至洗涤水为中性；

将洗涤后的活性炭投加至有机酸的乙醇溶液中，并向溶液中加入Cu²⁺或Fe³⁺的可溶盐水溶液，混合吸附，在60-80℃继续搅拌10-15min；

过滤，用乙醇的水溶液冲洗，洗去活性炭表面多余的有机酸和多余的金属离子，干燥后得固相萃取剂。

6.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于：有机酸的乙醇溶液的浓度为100-200μl/ml，Cu²⁺或Fe³⁺的可溶盐水溶液的浓度为0.3-0.8mol/L，有机酸的乙醇溶液与Cu²⁺或Fe³⁺的可溶盐水溶液的体积比为10-15:1；

进一步的，混合吸附过程中，固液的质量比为1:5-10。

7.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于：Cu²⁺的可溶盐为CuCl₂、Cu(NO₃)₂或CuSO₄，Fe³⁺的可溶盐为FeCl₃或Fe₂(SO₄)₃。

8.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于：对固相萃取剂进行洗脱附的洗脱剂为甲醇，洗脱的方法，包括如下步骤：向吸附有黄曲霉毒素的固相萃取剂中加入甲醇，固相萃取剂与甲醇的体积比为1:1-3，涡旋混合，固液分离，重复2-3次，合并甲醇，得到待测样品溶液；

进一步的，涡旋的温度为30-40℃，涡旋的时间为10-15min；

进一步的，将合并后的甲醇用0.45μm滤膜过滤。

9.一种花生油中黄曲霉毒素的检测方法，其特征在于：包括上述花生油中黄曲霉毒素的前处理方法。

10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于：还包括将得到的待测样品溶液进行高效液相色谱检测的步骤，液相色谱的条件为：色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×250mm，5.0μm；流动相A：甲醇，流动相B：水，梯度洗脱，流速为1.0ml/min，进样量25μL，柱温30℃；

梯度洗脱程序为：0-2min，甲醇90％，水10％；2-5min，甲醇60％，水40％；5-10min，甲醇50％，水50％。