[发明专利]一种防衰老护肤组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种防衰老护肤组合物，其特征在于，包括A组分和B组分；A组分为含有左旋维生素C的间充质干细胞分泌液，其中，左旋维生素C的添加量为0.1-0.3g/mL；B组分为人参皂苷提取液；A组分和B组分的体积比为80-120:1。

2.根据权利要求1所述的防衰老护肤组合物，其特征在于，左旋维生素C的添加量为0.2g/mL。

3.根据权利要求1所述的防衰老护肤组合物，其特征在于，A组分和B组分的体积比为100:1。

4.根据权利要求1-3任一项所述的防衰老护肤组合物，其特征在于，所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞。

5.根据权利要求4所述的防衰老护肤组合物，其特征在于，所述A组分的制备方法为：无菌条件下收集新生儿脐带，将血液冲洗干净，剥离脐动脉及脐静脉，将剩余组织剪碎至1mm³后，加入0.1％IV型胶原酶37℃振荡消化60min，然后加入0.25％胰酶继续37℃振荡消化30min，利用200目不锈钢滤网过滤后，收集细胞，DMEM重悬细胞接种于培养瓶内，在CO₂浓度为5％、37℃下进行原代培养，待细胞生长至80-90％融合后，收集细胞上清液至离心管中备用，细胞进行1：3传代培养，待细胞80％以上融合时，收集细胞上清液至离心管中备用，细胞再进行1：3传代培养，一直培养至第五代；收集P1-P5代细胞上清液，离心浓缩10倍，加入所述添加量的左旋维生素C，得到含有左旋维生素C的间充质干细胞分泌液。

6.根据权利要求1所述的防衰老护肤组合物，其特征在于，所述B组分的制备方法为：取人参须根，粉碎，加pH为11的碱水浸泡过夜，超声提取3次，每次30min，抽滤，合并滤液，上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至洗脱液无色，再用80％乙醇洗脱至薄层色谱检查出液无皂苷为止，将乙醇洗脱液减压回收至干，残渣即为人参皂苷粗品，将粗品溶于20倍量的95％乙醇中超声溶解，抽滤，滤液减压回收至干，残渣溶于10倍纯水，得到人参皂苷提取液。

7.根据权利要求1-3任一项所述的防衰老护肤组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)A组分的制备：无菌条件下收集新生儿脐带，将血液冲洗干净，剥离脐动脉及脐静脉，将剩余组织剪碎至1mm³后，加入0.1％IV型胶原酶37℃振荡消化60min，然后加入0.25％胰酶继续37℃振荡消化30min，利用200目不锈钢滤网过滤后，收集细胞，DMEM重悬细胞接种于培养瓶内，在CO₂浓度为5％、37℃下进行原代培养，待细胞生长至80-90％融合后，收集细胞上清液至离心管中备用，细胞进行1：3传代培养，待细胞80％以上融合时，收集细胞上清液至离心管中备用，细胞再进行1：3传代培养，一直培养至第五代；收集P1-P5代细胞上清液，离心浓缩10倍，加入所述添加量的左旋维生素C，得到含有左旋维生素C的间充质干细胞分泌液，4℃存储；

(2)B组分的制备：取人参须根，粉碎，加pH为11的碱水浸泡过夜，超声提取3次，每次30min，抽滤，合并滤液，上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱至洗脱液无色，再用80％乙醇洗脱至薄层色谱检查出液无皂苷为止，将乙醇洗脱液减压回收至干，残渣即为人参皂苷粗品，将粗品溶于20倍量的95％乙醇中超声溶解，抽滤，滤液减压回收至干，残渣溶于10倍纯水，得到人参皂苷提取液，4℃存储；

(3)将A组分和B组分按照所述体积比进行混合，得到防衰老护肤组合物。