[发明专利]线粒体靶向性氮氧自由基化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及化合物制备和应用技术领域，特别是一种新型线粒体靶向性氮氧自由基化合物和制备方法，及其氮氧自由基化合物抗缺氧应用。本发明制备的线粒体靶向氮氧自由基，能使缺氧小鼠脑组织H₂O₂、NO、MDA和LD含量趋于正常，SOD、GSH‑px和LDH活力显著提高，CAT活力趋于正常，具有明显的抗缺氧活性，对于高原低压性缺氧导致的急性高原病、脑缺血缺氧性疾病和心肌缺血缺氧性疾病等具有明显的防治作用。通过小鼠密闭缺氧耐受力实验和低压氧舱模拟小鼠高原缺氧实验证实该类化合物具有明显的抗缺氧活性，且活性优于传统的氮氧自由基HPN。

技术领域

本发明涉及化合物制备和应用技术领域，特别是一种新型线粒体靶向性氮氧自由基化合物和制备方法，及其氮氧自由基化合物抗缺氧应用。

背景技术

急性高原反应的发病过程复杂, 其中缺氧为始动因素。越来越多的证据表明：缺氧诱发氧化应激和线粒体功能障碍是造成机体损伤的重要因素之一。此时给予自由基清除剂，通过减少缺氧诱导的自由基蓄积，可以减轻机体的损伤，缓解急性高原反应。氮氧自由基是一种新型自由基清除剂，能通过清除机体产生的过多自由基而对缺氧损伤具有保护作用。众所周知，线粒体是细胞内活性氧ROS产生的重要来源和主要靶标，尽管氮氧自由基容易穿透细胞膜，却很难进入线粒体膜。如果能够将氮氧自由基富集于线粒体中，直接清除异常增加的ROS，保护或维持缺氧过程中线粒体功能，预期能够进一步增强其对高原缺氧所致脑损伤的预防或治疗作用。

发明内容

本发明解决现有技术不足提供提供一类兼具自由基清除，同时能够富集与细胞线粒体的线粒体靶向氮氧自由基化合物。

本发明的另一目的是提供一种线粒体靶向氮氧自由基化合物的合成方法，及其在于提供线粒体靶向氮氧自由基化合物在制备抗缺氧损伤药物中的应用。

本发明解决其技术问题所采用技术方案为：

线粒体靶向性氮氧自由基化合物，结构通式如下：

其中X为选择羰基（C=O）或亚甲基（CH₂），n=1~9。

线粒体靶向性氮氧自由基化合物的制备方法，包括如下步骤：

A、将4-羟基苯甲醛与2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷进行缩合反应得4'-羟基-2-苯基-1,3-羟基咪唑，4-羟基苯甲醛与2,3-二甲基-2,3-二羟胺基丁烷以摩尔比1:1混合，然后经高碘酸钠INaO₄氧化反应，得4'-羟基-2-苯基咪唑啉自由基HPN；

B、二溴取代烷烃或溴代羧酸中加入三苯基膦混合，二溴取代烷烃或溴代羧酸与三苯基膦以摩尔比1:4~6混合，并在乙腈中回流反应24~36h，0.4~0.5 Mpa减压除去溶剂，加入乙醚反应后取沉淀物，沉淀物使用正己烷洗涤后得到取代三苯基膦衍生物；

C、将4'-羟基-2-苯基咪唑啉自由基HPN与取代三苯基膦衍生物混合，加入碳酸钾以乙腈为溶剂，HPN、取代三苯基膦衍生物和碳酸钾以摩尔比1:1:2混合，在60~80℃进行醚化反应；

D、通过常规柱层析法分离得到线粒体靶向性氮氧自由基化合物。

优选的，所述步骤C中将4'-羟基-2-苯基咪唑啉自由基HPN与取代三苯基膦衍生物混合，加入二环己基碳二亚胺DCC为缩合剂和4-二甲氨基吡啶DMAP为催化剂以CH₂Cl₂为溶剂，HPN、取代三苯基膦衍生物和DCC以摩尔比1:1:1混合，室温条件下进行酯化反应。

优选的，所述步骤C中将4'-羟基-2-苯基咪唑啉自由基HPN与取代三苯基膦衍生物混合，加入碳酸钾以乙腈为溶剂，HPN、取代三苯基膦衍生物和碳酸钾以摩尔比1:1:2混合，在80℃进行醚化反应。