[发明专利]一种同时对蓝靛果中9种花青素进行定性和定量检测的方法

说明书

一种同时对蓝靛果中9种花青素进行定性和定量检测的方法，本发明涉及蓝靛果中花青素的检测方法。本发明是要解决现有的蓝靛果花青素检测方法难于同时定性和定量检测九种花青素的问题。本方法：一、提取蓝靛果中花青素，制备样品溶液；二、用9种花青素标准品配制标准溶液；三、以甲酸水溶液和乙腈作为流动相，设定梯度洗脱程序对各种标准品进行高效液相色谱检测，记录它们的保留时间及浓度和峰面积，并分别绘制各种标准品的浓度与峰面积之间的标准曲线；四、在相同条件下检测样品溶液的液相色谱，通过比对和计算完成定性和定量检测。本发明的方法可在20分钟内完成蓝靛果中9种花青素检测，用时短，可用于检测领域。

技术领域

本发明涉及蓝靛果中花青素的检测方法。

背景技术

蓝靛果(Lonicera caerulea L.var.edulis)属于被子植物门、双子叶植物纲、茜草目、忍冬科、忍冬属多年生落叶小灌木，学名又称蓝果忍冬；俗称山茄子、羊奶子、黑瞎子果等。适生于高寒地区，耐-55℃左右低温，是一种我国东北林区非常有特点的野生浆果。蓝靛果中含有丰富的花青素，花青素具有抗氧化、降血脂、抗癌、抗疲劳等多种功效，是蓝靛果中重要的功能营养成份。蓝靛果中含有多种花青素，如矢车菊素-3,5-双葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-芸香糖苷、芍药素-3,5-双葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-芸香糖苷、天竺葵素-3-O-葡萄糖苷、芍药素-3-O-葡萄糖苷和芍药素-3-O-芸香糖苷等，目前已经报道的蓝靛果花青素检测方法只能检测其中少数几种花青素，同时对9种花青素进行定性、定量检测的方法较少，影响了蓝靛果及蓝靛果相关产品中花青素的检测，也在一定程度上限制了蓝靛果花青素的研究与应用。

发明内容

本发明是要解决现有的蓝靛果花青素检测方法难于同时定性和定量检测矢车菊素-3,5-双葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-芸香糖苷、芍药素-3,5-双葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-芸香糖苷、天竺葵素-3-O-葡萄糖苷、芍药素-3-O-葡萄糖苷和芍药素-3-O-芸香糖苷这九种花青素的问题，提供一种同时检测蓝靛果中9种花青素的方法，该方法成本低、易于操作、检测线性范围宽，可准确高效的对蓝靛果中的花青素进行定性、定量分析。

本发明一种同时对蓝靛果中9种花青素进行定性和定量检测的方法，按以下步骤进行：

一、提取蓝靛果中花青素，用去离子水溶解，再用滤膜过滤，得到样品溶液；

二、分别配制矢车菊素-3,5-双葡萄糖苷标准品、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷标准品、飞燕草素-3-O-芸香糖苷标准品、芍药素-3,5-双葡萄糖苷标准品、矢车菊素-3-O-芸香糖苷标准品、天竺葵素-3-O-葡萄糖苷标准品、芍药素-3-O-葡萄糖苷标准品、芍药素-3-O-芸香糖苷标准品和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷标准品的标准溶液；

三、采用高效液相色谱仪对各个标准溶液在相同的条件下进行检测，其中高效液相色谱仪的色谱柱的参数如下：

色谱柱：以十八烷基键合硅胶为填充剂的C18色谱柱；

柱温：30～35℃；

流动相A：质量百分数为2％～4％的甲酸水溶液；流动相B：乙腈；

进样量：10μL；

流动相梯度洗脱程序为：洗脱时间为15～20min，从开始洗脱至洗脱结束这段洗脱时间内，流动相A的体积百分数从89％～91％均匀降低至85％～87％；流动相B的体积百分数9％～11％均匀提高至13％～15％；洗脱过程中的任意时刻流动相A与流动相B的体积百分数之和为100％；

流动相流速为：0.8～1.2mL/min；

二极管阵列检测器(DAD)的检测波长为：520nm和210～600nm；