[发明专利]一种大豆叶特异启动子GmGLP3（Glyma16g00980）及其分离方法和应用在审
| 申请号： | 201910365720.0 | 申请日： | 2019-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN110106174A | 公开（公告）日： | 2019-08-09 |
| 发明（设计）人： | 寻红卫;钱雪艳;庞劲松;郭东全;杨向东;于佳淼;刘宝;董英山 | 申请（专利权）人： | 吉林省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20;A01H6/54 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 130124 吉*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 大豆叶 特异启动子 高效表达 拟南芥叶 多核苷酸序列 大豆基因 抗病基因 模式植物 组织部位 植株 大豆根 高表达 可食用 转基因 侵染 病虫害 应用 驱动 预防 | ||
1.一种大豆叶特异启动子GmGLP3，其特征在于，具有SEQ ID NO 1所示的多核苷酸序列。
2.与权利要求1所述的大豆叶特异启动子GmGLP3互补的多核苷酸序列SEQ ID NO 2。
3.根据权利要求1所述的一种大豆叶特异启动子GmGLP3，其特征在于，所述大豆叶特异启动子GmGLP3能够在拟南芥叶中特异表达，在别的组织部位几乎不表达，并且不能在大豆根中表达。
4.一种如权利要求1所述的大豆叶特异启动子GmGLP3的分离方法，其特征在于，包括以下操作步骤：
(1)根据已发表的大豆转录组数据，挑选出在叶表达量较高，而其他组织中表达量很低或根本没有表达的的基因；
(2)根据候选基因的基因号在植物全基因组信息数据库Phytozome中查找到基因序列，并用Primer5软件设计RT-PCR引物，设计完成的引物在NCBI网站上进行比对，取只能比对到大豆mRNA数据库中一条模板的引物为最终采用的引物序列；
(3)根据基因的基因编号，在植物全基因组信息数据库Phytozome中查找到候选基因上游2500bp的序列作为启动子的备选序列，对各序列进行酶切位点分析后，设计特异性引物扩增该启动子区，使最终克隆得到的启动子片段在2000bp，在正向引物和反向引物的5’端分别引入Pst I酶切位点和BamH I酶切位点以及保护碱基。
5.权利要求1所述的一种大豆叶特异启动子GmGLP3在预防病虫害侵染大豆叶部中的应用。
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