[发明专利]中性腹膜透析液中葡萄糖转化产物的含量测定方法

说明书

本发明提出一种中性腹膜透析液中葡萄糖转化产物的含量测定方法，属于检测技术领域，该方法专属性强，检测周期短，分析结果可准确地测定中性腹膜透析液中在高无机盐含量干扰时果糖的含量。该技术方案包括采用HPLC法检测，采用标准曲线法或外标法定量，其中，所采用的色谱柱为CarboSep CHO‑620柱。本发明能够应用于中性腹膜透析液中果糖含量的质量控制中。

技术领域

本发明属于检测技术领域，尤其涉及一种中性腹膜透析液中葡萄糖转化产物的含量测定方法。

背景技术

果糖和葡萄糖为分子量相同的两种异构体，果糖为己酮糖，葡萄糖为己醛糖，因此不能用惯见的分离方法进行分离。腹膜透析液在高温灭菌过程中无水葡萄糖会部分转化生成果糖，果糖无明显毒副作用，但果糖的存在会影响主成分葡萄糖的含量，影响中性腹膜透析液的药效。

Ca²⁺型树脂可与果糖形成稳定的络合物，吸附柱内的吸附剂(Ca²⁺树脂)对果糖进行吸附，而葡萄糖不会形成此种络合物，不被吸附(或吸附力小于果糖)。因此，Ca²⁺型树脂有利于果糖和葡萄糖得以分离。

中性腹膜透析液分为A液、B液两室，对于B液而言，由于其组分中包含1.9％-3.6％的无机盐，而高无机盐含量会对腹膜透析液中果糖含量的检测产生干扰严重，因此，如何选用合适的Ca²⁺型树脂以及如何设定检测过程中的参数条件这对于腹膜透析液中果糖含量的测定至关重要。因此，如何建立一套完善的针对中性腹膜透析液中果糖含量的分析方法是本领域需要不断摸索探求的。

发明内容

本发明提出一种中性腹膜透析液中葡萄糖转化产物的含量测定方法，该方法专属性强，检测周期短，分析结果可准确地测定中性腹膜透析液中在高无机盐含量干扰时果糖的含量。

为了达到上述目的，本发明提供了一种中性腹膜透析液中葡萄糖转化产物的含量测定方法，所述测定方法采用HPLC法检测，采用标准曲线法或外标法定量，其中，所采用的色谱柱为CarboSep CHO-620 Ca型糖柱。

作为优选，所述HPLC法的色谱条件为：流动相为超纯水，流速为0.15-0.9ml/min，检测器为示差折光检测器，柱温为45-85℃，检测器温度为30-60℃。

作为优选，包括以下步骤：

样品溶液的制备：精密量取中性腹膜透析液于容量瓶中，加入超纯水并稀释至刻度，摇匀、滤膜过滤，作为样品溶液；

对照品的制备：精密称取果糖至容量瓶中，加入超纯水并稀释至刻度，摇匀、滤膜过滤，作为对照品溶液；

HPLC测定：将对照品溶液和样品溶液进行HPLC测定，色谱柱为CarboSep CHO-620Ca型糖柱，流动相为超纯水，流速为0.15-0.9ml/min，检测器为示差折光检测器，柱温为45-85℃，检测器温度为30-60℃；

计算：采用标准曲线法或外标法定量，色谱图记录与处理由工作站完成，理论塔板数按果糖峰计算不低于2000。

作为优选，在采用HPLC法进行含量测定前，还包括进行系统适应性试验，判断果糖峰和葡萄糖峰的分离度是否符合要求。

作为优选，所述系统适应性试验包括如下步骤：

精密称取果糖和无水葡萄糖至同一容量瓶中，加入超纯水，配制成每1ml中含0.15mg果糖和0.15mg无水葡萄糖的系统适应性溶液；

将系统适应性溶液进行HPLC测定，色谱柱为CarboSep CHO-620 Ca型糖柱，流动相为超纯水，流速为0.15-0.9ml/min，检测器为示差折光检测器，柱温为45-85℃，检测器温度为30-60℃；