[发明专利]一种同时分析生物组织中多种胺类代谢物的质谱成像方法有效
申请号: | 201910317760.8 | 申请日: | 2019-04-19 |
公开(公告)号: | CN110018225B | 公开(公告)日: | 2022-04-22 |
发明(设计)人: | 孙成龙;王晓;赵恒强;马春霞;刘伟;耿岩玲 | 申请(专利权)人: | 山东省分析测试中心 |
主分类号: | G01N27/64 | 分类号: | G01N27/64 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 郑平 |
地址: | 250014 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 分析 生物 组织 多种 代谢物 成像 方法 | ||
1.一种同时分析生物组织中多种胺类代谢物的质谱成像方法,其特征在于,所述方法包括:
将新鲜生物组织制冰冻切片转移至导电载玻片上,抽真空后进行冰丙酮处理;
将基质溶液喷涂至冰丙酮处理后的组织切片上,进行MALDI质谱成像分析;
所述基质溶液中基质为1,5-二氨基萘;
所述胺类代谢物包括胆碱、甘油磷酸胆碱、肉碱、乙酰肉碱、丙酰肉碱、组胺、精胺、亚精胺、甜菜碱、丁酰肉碱、戊酰肉碱、C18:0肉碱、乙酰胆碱、肌酸、组氨酸和磷酸胆碱。
2.如权利要求1所述的质谱成像方法,其特征在于,所述冰冻切片的厚度为10~18微米。
3.如权利要求2所述的质谱成像方法,其特征在于,所述冰冻切片的厚度为12毫米。
4.如权利要求1所述的质谱成像方法,其特征在于,所述冰丙酮处理具体方法为:将冰冻切片置于冰丙酮中震荡处理,震荡转速为40~80次/分钟,震荡时间为1-15分钟。
5.如权利要求4所述的质谱成像方法,其特征在于,震荡转速为60次/分钟。
6.如权利要求4所述的质谱成像方法,其特征在于,震荡时间为15分钟。
7.如权利要求1所述的质谱成像方法,其特征在于,所述基质溶液中的溶剂为乙腈和水的混合物。
8.如权利要求7所述的质谱成像方法,其特征在于,乙腈和水的体积比为1:1。
9.如权利要求1所述的质谱成像方法,其特征在于,所述基质溶液配制浓度为1~5mg/mL。
10.如权利要求9所述的质谱成像方法,其特征在于,所述基质溶液配制浓度为2.5mg/mL。
11.如权利要求1所述的质谱成像方法,其特征在于,喷涂处理具体条件为:喷涂速率为0.05~0.15mL/分钟,喷涂温度为40~60℃,喷嘴轨道速度为750~850mm/分钟,喷嘴轨道间距为2~5mm,循环次数为6~12次。
12.如权利要求11所述的质谱成像方法,其特征在于,喷涂速率为0.075mL/分钟,喷涂温度为55℃,喷嘴轨道速度为800mm/分钟,喷嘴轨道间距为3mm,循环次数为8次。
13.如权利要求1所述的质谱成像方法,其特征在于,所述同时分析生物组织中多种胺类代谢物的质谱成像方法还包括将多种胺类代谢物进行靶向质谱成像数据提取,获得其离子强度和可视化成像图。
14.权利要求1-13任一项所述方法在对生物组织中小分子胺类代谢物分析中的应用。
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