[发明专利]水稻杂交种的生产方法

权利要求书

1.一种水稻杂交种的生产方法，其特征在于，包括：

步骤一、将线粒体信号肽的碱基序列、WA352基因序列和外源报告基因共同整合到野生型水稻染色体上，得到含有线粒体信号肽的碱基序列、WA352基因序列和外源报告基因的转基因不育株系，其中，所述WA352基因序列如SEQ ID NO:1所示，所述线粒体信号肽的碱基序列和WA352基因序列由绒毡层特异表达启动子pUTD1序列调控，pUTD1启动子序列的碱基序列如SEQ ID NO:3所示，所述线粒体信号肽的碱基序列、WA352基因序列和外源报告基因连锁表达，如SEQ ID NO:7所示的碱基序列包含所述线粒体信号肽的碱基序列、WA352基因序列和外源报告基因的碱基序列，且两端分别有BglII和XhoI酶切位点；

步骤二、将所述转基因不育株系作为母本，以恢复系作为父本，进行杂交，获得F1代种子，带有所述外源报告基因的F1代种子为不育种子，剩余F1代种子为正常杂交水稻种子，以生产杂交水稻。

2.如权利要求1所述的水稻杂交种的生产方法，其特征在于，所述线粒体信号肽的碱基序列如SEQ ID NO:2所示。

3.如权利要求1所述的水稻杂交种的生产方法，其特征在于，所述外源报告基因由糊粉层特异启动子Ltp2调控表达，所述启动子Ltp2的碱基序列如SEQ ID NO:4所示。

4.如权利要求1所述的水稻杂交种的生产方法，其特征在于，步骤一中，将如SEQ IDNO:7所示的碱基序列构建到pCAMBIA1300载体上，得到pCAMBIA1300-WA352表达载体，然后将pCAMBIA1300-WA352表达载体通过农杆菌介导方法侵染水稻愈伤组织转化入野生型水稻的染色体上，以将线粒体信号肽的碱基序列、WA352基因序列和外源报告基因共同整合到野生型水稻染色体上。

5.如权利要求1所述的水稻杂交种的生产方法，其特征在于，所述恢复系为发育正常的水稻常规品种，为水稻9311、华占或R900。

6.如权利要求1所述水稻杂交种的生产方法，其特征在于，所述外源报告基因为红色荧光标记基因。

7.如权利要求6所述的水稻杂交种的生产方法，其特征在于，通过PCR方法转基因T0代植株，PCR方法中采用的引物对如SEQ ID NO:5和6所示。