[发明专利]一种葛根多糖脱蛋白的方法

说明书

本发明公开了一种葛根多糖脱蛋白的方法，涉及葛根多糖提纯技术领域，将葛根多糖溶于去离子水中，配成葛根多糖溶液，经离心过滤后，采用聚酰胺对葛根多糖溶液进行脱蛋白处理，收集经聚酰胺处理后的多糖溶液，经旋转蒸发浓缩后冷冻干燥得去除蛋白的葛根多糖，本发明得到的葛根多糖蛋白去除率和多糖保留率高，操作简便，处理条件温和，洗脱液为蒸馏水，避免了大量溶剂的使用，可以保持葛根多糖的生物活性，同时聚酰胺柱可以反复利用。

技术领域

本发明涉及葛根多糖提纯技术领域，特别是指一种葛根多糖脱蛋白的方法。

背景技术

葛根(Radix Puerariae)是多年生豆科葛属植物的块根，始载于《神农本草经》，具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻等功效。随着现代医药、食品科技的不断发展，葛根的使用价值越来越引起人们的关注，我国葛根资源极为丰富，除新疆、西藏、青海外，各省均有分布，葛根的主要组成为淀粉、纤维素、蛋白质、总黄酮和多糖等。

多糖因其生物学活性而受到世界各国科学工作者的重视，大量的动物和临床实验表明其在人类健康上扮演着重要的角色，如抗氧化、抗凝血、抗辖射、抗HIV、抗癌、降低血糖、增强免疫等生物活性。多糖的结构决定了其具有广泛的生物学活性，多糖的纯化是多糖结构分析的前提。

去除蛋白质是多糖纯化的重要一步，天然植物水提取液中多糖多与游离蛋白质共存。多糖提取液脱蛋白的主要方法有Sevage法、三氯乙酸法和三氟三氯乙烷法。其中，Sevage法条件温和，是脱蛋白的经典方法，但需要反复处理样品多次，致使多糖损失严重且方法烦琐，而且使用有机溶剂，容易造成环境污染；三氯乙酸法操作时沉淀现象比Sevage法明显，但脱蛋白时易损失较多多糖，对多糖结构影响较大，脱蛋白的效果较差；三氟三氯乙烷法脱除蛋白的效率较高，但溶剂沸点较低、易挥发，不宜大量应用。“一种芒果加工副产物多糖脱蛋白及脱色方法”(申请号CN201710394098)使用TCA正丁醇法，属于有机溶剂脱蛋白，易造成污染环境；“一种状元豆多糖脱色脱蛋白的纯化方法”(申请号CN201710249849)，虽然没有使用有机溶剂，而是使用D113弱酸性阳离子交换树脂脱蛋白，但是优化后最高蛋白去除率为91.11％，无法满足多糖纯化的要求。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提出一种葛根多糖脱蛋白的方法，以解决现有技术中全部或者部分不足之处。

基于上述目的本发明提供的一种葛根多糖脱蛋白的方法，将葛根多糖溶于去离子水中，配成葛根多糖溶液，经离心过滤后，采用聚酰胺对葛根多糖溶液进行脱蛋白处理，收集经聚酰胺处理后的多糖溶液，经旋转蒸发浓缩后冷冻干燥得去除蛋白的葛根多糖。

可选的，所述脱蛋白处理的方法为聚酰胺水浴静态法或聚酰胺柱洗脱动态法。

可选的，所述聚酰胺水浴静态法中，葛根多糖溶液的浓度为1～3mg/mL，聚酰胺为80～100目的颗粒，添加量为1～5g/L。

可选的，所述聚酰胺水浴静态法中，水浴振荡1～3h，温度为30～60℃，转速120～180r/min。

可选的，所述聚酰胺柱洗脱动态法中，葛根多糖溶液的浓度为10～30mg/mL，聚酰胺柱规格600×30mm，流动相为蒸馏水。

可选的，聚酰胺柱洗脱动态法中，流速为1～3mL/min，收集器2～4min转一次，并采用苯酚-硫酸法跟踪检测洗脱溶液。

可选的，所述脱蛋白处理中的聚酰胺均为预处理的聚酰胺，预处理方法如下：用浓度75％～85％乙醇溶液处理聚酰胺，去除溶于乙醇的杂质，用蒸馏水将聚酰胺洗脱至中性。

可选的，所述旋转蒸发浓缩，采用聚酰胺水浴静态法的浓缩至原体积的1/5～1/4；采用聚酰胺柱洗脱动态法的浓缩至原体积的1/10～1/8。