[发明专利]红翅槭丛生芽诱导与生根技术

说明书

本发明公开了一种红翅槭丛生芽诱导与生根技术：取当年生幼嫩枝条剪去叶片后水洗，再洗衣液浸泡；经酒精消毒后用升汞灭菌，再用无菌水清洗；切1cm带芽茎段接种于诱导培养基MS+0.5mg/L 6BA+0.3mg/L NAA中，进行腋芽诱导培养；选取无菌腋芽已诱导萌发的茎段接种于增殖培养基3/4MS+0.4mg/L 6BA+0.2mg/L NAA中，进行丛生芽增殖培养；选取无菌丛生芽切1cm，在带顶芽健壮芽条接种于生根培养基1/2MS+0.5mg/L ABT中，暗培养后转光培养进行诱导生根。本发明不产生愈伤组织，保留了母树优良性状，不产生变异，突破了生根技术，实现红翅槭无性繁殖和工产化脱毒育苗。

技术领域

本发明涉及植物组织培养方法，具体涉及红翅槭丛生芽诱导与生根技术。

背景技术

目前红翅槭丛生芽诱导普遍采用通过愈伤组织分化而成，该方法存在以下三个缺陷：一是现有红翅槭组培技术是通过愈伤组织途径，诱导的丛生芽存在一定程度的变异，其变异率呈随机分布，最高可达100％；二是现有红翅槭组培技术不能实现植株再生，无法达到无性繁殖的要求；三是通过愈伤组织途径的组培技术，其组培生根技术尚未见报道，即便突破生根技术，其后代变异的概率也呈随机分布，其技术极为不稳定，不能应用与生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种技术稳定可靠、生产高效并可实现量产的红翅槭丛生芽诱导与生根技术，解决现有技术中红翅槭组培诱导的丛生芽存在变异、技术不稳定且无法量产的问题。

为实现以上目的，本发明红翅槭丛生芽诱导与生根技术包括外植体诱导、丛生芽增殖培养和生根培养三个阶段，具体操作步骤如下：

(1)外植体诱导：取当年生幼嫩枝条并剪去叶片后在流水中冲洗1-2小时，再用洗衣粉溶液浸泡；在洁净的工作台上将处理后的枝条先用质量比浓度75％的酒精消毒55-65S，再用质量比浓度0.1％的升汞灭菌10-15分钟，最后用无菌水清洗3-4遍；切取1cm带芽茎段接种于诱导培养基MS+0.5mg/L 6BA+0.3mg/L NAA中，置于培养室25-35天进行腋芽诱导培养；

(2)丛生芽增殖培养：选取无菌腋芽已诱导萌发的茎段在洁净工作台上接种于增殖培养基3/4MS+0.4mg/L 6BA+0.2mg/L NAA中，置于培养室30-40天进行丛生芽增殖培养；培养条件：室温25-28℃，光照9-11小时/天，光强4000-6000lx；

(3)生根培养：选取无菌丛生芽在洁净工作台上切取1cm，在带顶芽健壮芽条接种于生根培养基1/2MS+0.5mg/L ABT中，在培养室先进行10-15天暗培养后转光培养进行诱导生根；培养条件：室温25-28℃，光照9-11小时/天，光强2000-3000lx。

本发明红翅槭丛生芽诱导与生根技术通过红翅槭带芽茎段诱导丛生芽，不产生愈伤组织，保留了母树的优良性状，不产生变异，同时在诱导的丛生芽的基础上突破其生根技术，实现了红翅槭无性繁殖，并可应用于工厂化快速育苗，实现红翅槭工产化脱毒育苗。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明红翅槭丛生芽诱导与生根技术作进一步详细描述。

实施例1

本发明红翅槭丛生芽诱导与生根技术包括外植体诱导、丛生芽增殖培养和生根培养三个阶段，具体操作步骤如下：

(1)外植体诱导：取当年生幼嫩枝条并剪去叶片后在流水中冲洗1-2小时，再用洗衣粉溶液浸泡；在洁净的工作台上将处理后的枝条先用质量比浓度75％的酒精消毒60S，再用质量比浓度0.1％的升汞灭菌10分钟，最后用无菌水清洗4遍；切取1cm带芽茎段接种于诱导培养基MS+0.5mg/L 6BA+0.3mg/L NAA中，置于培养室30天进行腋芽诱导培养；