[发明专利]一种尖孢镰刀菌及其在修复邻苯二甲酸酯类化合物污染土壤中的应用

说明书

一种尖孢镰刀菌及其在修复邻苯二甲酸酯类化合物污染土壤中的应用。本发明采用梯度驯化法从从长期覆膜栽培蔬菜基地土壤筛选出1株邻苯二甲酸酯类化合物(PAEs)降解真菌FO‑Yi，经形态学特征及rRNA基因ITS1‑5.8S‑ITS2区序列分析，初步鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)，菌种保藏号为CCTCC NO：M2018571。该菌株FO‑Yi对土壤复合PAEs(DMP、DEP、DIBP、DNBP和DEHP)污染有良好的修复效果，在15d培养期内，可使PAEs总量达121.86mg·kg^－1的灭菌土壤和非灭土壤中的60.1％和80.5％得到降解，其中DMP的降解贡献率达30％以上。

技术领域

本发明属于土壤修复技术领域，具体涉及一种尖孢镰刀菌及其在修复邻苯二甲酸酯类化合物污染土壤中的应用。

背景技术

邻苯二甲酸酯(phthalatic acid esters，PaEs)作为增塑剂被广泛用于塑料、油漆、化 妆品等行业，2011年全球塑料增塑剂中的三分之二以上皆为邻苯二甲酸酯类，它们通过 从废弃塑料中溶出而迁移到土壤、水体和大气，后2者最后分别以大气沉降和污水灌溉形式汇集到土壤。目前，PaEs在我国农业土壤中检出率比较普遍，少数地区的农业土 壤中PaEs含量高达几十mg·kg-1。有研究证明，汇集到土壤的PaEs一方面通过淋 溶、地表径流进行再次迁移，另一方面以食物链蓄积和传递，对生态系统和人体健康造 成潜在威胁。至此，PaEs已成为土壤中不可忽视的一类持久性有机污染物，对其开展降 解研究尤其必要。目前报道的去除环境中PaEs的方法主要有生物降解、吸附、光化学 氧化法等，其中微生物代谢降解途径被认为最有效。细菌中的普罗威登斯菌属 (Providencia sp.)、农杆菌属(agrobacterium sp.)等，真菌中的瓜哇青霉、白腐真菌都被 发现具有降解PaEs的作用。由于土壤、水体中的PaEs往往污染为复合污染，已报道的菌 株能高效降解DMP且能同时降解其他邻苯二甲酸酯类化合物的还较少，且模拟浓度远 超出现实际环境浓度，与生产应用存在较大的差距。本研究从长沙县某长期覆膜栽培蔬 菜基地土壤中分离到1株可同时高效降解DMP、DEP和DEHP的真菌，采用形态观察 及rRNa基因ItS1-5.8S-ItS2区序列分析等手段对菌株进行了初步鉴定，并开展了室内外 土壤修复及对作物食用部分安全影响研究，旨在丰富PaEs降解微生物资源，提升 PaEs降解菌剂的实用性，为农业土壤修复提供理论依据。

发明内容

本发明采用梯度驯化法从从长期覆膜栽培蔬菜基地土壤筛选出1株邻苯二甲酸酯类化合物(PaEs)降解真菌FO-Yi，经形态学特征及rRNa基因ItS1-5.8S-ItS2区序列分 析，初步鉴定为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)，该菌株在PaEs无机筛选平板上的生 长菌落周围有明显的透明水解圈。

一种尖孢镰刀菌，其分类命名为镰刀菌属尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)，简称FO-Yi，已送交菌种保藏中心保藏，其中保藏日期2018年8月28日；检测完成日期： 2018年9月12日；菌种名称：尖孢镰刀菌FO-Yi(Fusarium oxysporum FO-Yi)保藏号： CCTCC NO：M2018571。保藏单位名称：中国典型培养物保藏中心；保藏单位地址： 中国武汉武汉大学，邮编：430072。

其中尖孢镰刀菌FO-Yi的形态学特征为：分生孢子梗直接生于菌丝，不分枝或简单分枝，大型分生孢子镰刀形，小型分生孢子长椭圆形、肾行、柱形，0-3隔，无色，7- 20*2.5-4μm。