[发明专利]一种怀菊组织培养快速育苗方法

说明书

本发明涉及怀菊组织培养快速育苗方法，可有效解决由于目前主要采用扦插、分株等繁殖方式，且常常连作，导致菊花病毒积累，引起品种退化，致使菊花产量和品质下降的问题，其解决的技术方案是，包括以下步骤:1）怀菊无菌苗的获得；2）组培快繁；3）炼苗；4）大田移植；本发明运用组培快繁技术，在组培室获得怀菊无菌苗，进行增殖、壮苗、生根、炼苗、移植，整个生产过程周期短，操作简便，增殖倍数较高，成本低，得到的大田苗成活率高，叶片颜色浓绿，无细弱茎，长势较好，是怀菊组织培养快速育苗方法上的创新。

技术领域

本发明涉及怀菊栽培技术领域，特别是一种怀菊组织培养快速育苗方法。

背景技术

怀菊，多年生菊科草本植物，药用价值较高，且历史久远。怀菊偏于平肝阳，因产于古怀庆府(今属河南省焦作市辖区)一带而得名，为著名的“四大怀药”之一。可疏风散热、解毒。具有抗氧化，保肝抗病毒、预防心血管疾病等多种药理活性。随着中医药的逐步发展，怀菊的用药需求也大大增长。

由于目前主要采用扦插、分株等繁殖方式，且常常连作，导致菊花病毒积累，引起品种退化，致使菊花产量和品质下降，因此，发明一种利用植物组织培养技术为怀菊复壮提供一种育苗方法势在必行。

发明内容

针对上述情况，为解决现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种怀菊组织培养快速育苗方法，可有效解决由于目前主要采用扦插、分株等繁殖方式，且常常连作，导致菊花病毒积累，引起品种退化，致使菊花产量和品质下降的问题。

本发明解决的技术方案是，包括以下步骤:

1)怀菊无菌苗的获得：采集2～3cm的怀菊顶芽，0.1％的升汞消毒3min，灭菌水冲洗5～6遍，将其接种于第一固体培养基上，调pH值为5.8，放置在22-24℃、相对湿度60％、光强1500-2000lx、光照时间12h·d-1的条件下进行培养；

2)组培快繁：剪取健壮怀菊组培苗的幼嫩叶片0.5cm×0.5cm，仍将其接种于第一固体培养基上，使第一固体培养基pH值为5.8，放在无菌室培养出芽丛，再将芽接种于第二固体培养基，调pH值为5.8，放置在22-24℃、相对湿度60％、光强1500-2000lx、光照时间12h·d-1的条件下进行生根培养；

3)炼苗：幼苗长到5cm高的时候，可以将其瓶口打开，进行炼苗5-7天，洗净根部的培养基之后，移栽到药用植物园的室外大棚，大棚内温度25～27℃，湿度为60％～80％，种植于pH值为6.5～7的营养土、蛭石比例为1:2的混合基质中，置于阴凉通风处，用水浇透；所述的营养土组成为全氮(N)0.68g/L、五氧化二磷(P₂O₅)0.27g/L、氧化钾(K₂O)0.36g/L组成；

4)大田移植：炼苗一月后，移植入大田，选取肥沃疏松，排水良好的壤土为宜，将过长的根、老根及苗的顶端切掉，根保留6～7cm，地上部分保留14-16cm，按行距40cm，株距30cm，开穴6～10cm深，每穴1株，栽后覆土压实，并及时浇水；

所述的第一固体培养基为1L的MS培养基(MS培养基的具体配方用量见附表1)中加入0.5mg的6-BA(6苄基腺嘌呤)、0.1mg的NAA(萘乙酸)、30g蔗糖、6.5g琼脂制成；

所述的第二固体培养基为每1L的1/2MS(MS培养基配方中的大量元素成分减半，1/2MS培养基的具体配方用量见附表2)培养基中加入0.1mg的IBA(吲哚丁酸)、0.05mg的NAA、30g蔗糖、6.5g琼脂。

作为优选，步骤1)中，将消毒灭菌后的顶芽接入第一固体培养基时，使顶芽底部接触培养基(叶片不接触)，每瓶接种5个顶芽，使间距为1.5-2.5cm。

作为优选，步骤3)中，洗净组培苗根部的培养基之后，在多菌灵溶液中浸泡15min，再移栽。