[发明专利]一种尿液巯基化合物无汞检测试纸条及制备方法

说明书

本发明属于体外诊断领域技术领域，具体涉及尿液巯基化合物无汞检测试纸条及制备方法。所述试纸条包括滤纸和负载所述滤纸上的DTNB和EDTA。所述制备方法包括如下步骤：配置缓冲液，将需要负载在滤纸上的组分溶解在所述缓冲液中，将该混合溶液通过浸泡的方法施加在所述滤纸上，待其干燥后切成小块，并粘贴于塑料条上待用。本发明提供的技术方案采用DTNB作为巯基显色剂并成功将其改进为试纸条式的尿液检测试剂，其中不再含有汞等重金属离子，也不含有三氯乙酸等腐蚀性物质，提高了使用安全性，另外检测速率大大加快，从至少15分钟缩短至5分钟以内，从而解决了试纸条检测对显色时间要求的问题。

技术领域

本发明属于体外诊断领域技术领域，具体涉及一种尿液巯基化合物无汞检测试纸条及制备方法。

背景技术

在全世界危害女性健康的恶性肿瘤中，子宫颈癌被列在第三位，据统计，2008年在全球女性所有新发癌症中，新发子宫颈癌所占的比例为9％(529800例)，仅次于乳腺癌和结肠直肠癌。而在女性癌症致死的患者中，女性癌症患者死于宫颈癌的为8％(275100例)，位居第四。而死于子宫颈癌的患者当中又有大约23万人是属于发展中国家的，大约占总人数的83％。在我国，据统计每年新发子宫颈癌患者约例130000例。

宫颈癌前病变和宫颈癌发病的整个过程中巯基分子不可逆脱落并经尿液排出体外。因此检测尿液中的巯基化合物可用于宫颈癌的筛查和辅助诊断。

现有的尿液中巯基检测技术中主要采用磷钨酸法实现检测，比如中国专利：CN107576652A一种尿液中巯基化合物的检测试剂及其制备方法与用途，CN105115966A尿液中巯基类化合物检测试剂盒及制备方法和应用和CN106468715A一种宫颈癌尿液检测试剂及其制备方法和应用，该方法有以下缺陷：1)检测方法中都含有汞离子，这种手动操作加样的产品来说，汞的存在具有极大的毒性，另外，检测废液中汞、镍等重金属离子也会对环境造成影响，需要特殊的处理；2)试剂中存在三氯乙酸等腐蚀性物质对操作者也有一定程度的影响，3)试剂中汞离子容易受到尿液中的高浓度尿酸影响，产生极大干扰，造成假阴性结果，4)目前检测试剂盒均是采用安瓿瓶液体包装，然后与尿液混合检测，这种包装体积大、运输不便、废弃物较多。

发明内容

本发明提供了一种尿液巯基化合物无汞检测试纸条及制备方法，用以解决目前尿液巯基化合物检测试剂存在的一系列问题。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是：所述尿液巯基化合物无汞检测试纸条，其包括滤纸和负载所述滤纸上的DTNB(5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸))和EDTA(乙二胺四乙酸二钠)、2-甲基-2,4戊二醇、硅钨酸和表面活性剂。

无色的5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(5,5'-Dithiobis-(2-nitrobenzoicacid，DTNB)与巯基化合物反应被转变成黄色的5-巯基-2硝基苯甲酸，可根据黄色深浅来进行半定量的判断。

尿液中有时候会存在蛋白、维生素C、尿酸等还原性物质，这些物质的存在会影响检测，造成假阳性的结果。2-甲基-2,4戊二醇作为蛋白沉淀剂，硅钨酸的氧化性可以有效降低这些物质带来的不利影响，并且为了配合试纸条生产和使用，选择更为安全、无特殊气味和稳定的2-甲基-2,4戊二醇，另外硅钨酸的酸性环境也可以辅助DTNB更加稳定。

可选地，所述表面活性剂选自Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)和/或聚乙二醇。DTNB作为显色剂还存在一个贮存稳定性的问题，通过在缓冲液中添加适量的Triton X-100和/聚乙二醇，配置的试纸条可以长期保存，解决了其产品化的问题。

可选地，所述滤纸上还负载了亮绿染料。亮绿的加入使得该试纸条的颜色变化更明显，更有利于肉眼判读。