[发明专利]一种脂肪组织中的血管基质成分的提取方法及应用在审
申请号: | 201910277643.3 | 申请日: | 2019-04-08 |
公开(公告)号: | CN110129260A | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 李陶;张晓文 | 申请(专利权)人: | 奥尔文(深圳)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077;C12N5/0775;A61K35/35;A61P17/18 |
代理公司: | 北京睿派知识产权代理事务所(普通合伙) 11597 | 代理人: | 刘锋;邸岩 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区南*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 脂肪组织 血管基质 低温酶解 机械剪切 温度条件 吹打 酶解液 祖细胞 抽吸 得率 振荡 应用 消化 | ||
1.一种脂肪组织中的血管基质成分的提取方法,其特征在于,所述方法包括:
步骤1,采集脂肪组织,加入缓冲液清洗脂肪组织,以去除血细胞;
步骤2,加入缓冲液重悬脂肪组织,离心后吸弃上层油脂;
步骤3,反复抽吸、吹打所述脂肪组织,以获得乳糜状脂肪组织;
步骤4,加入酶解液,在2℃-8℃振荡消化,离心后取沉淀;
步骤5,过滤所述沉淀,在所述沉淀中加入缓冲液后离心,得到血管基质成分。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述加入酶解液具体为,加入与所述脂肪组织等体积的酶解液。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述酶解液为浓度为0.2%的Ⅰ型胶原酶水溶液。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述在2℃-8℃振荡消化的具体条件为:在4℃以50-100rpm振荡消化3小时。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤4中,所述离心的具体条件为300xg离心10min。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,过滤所述沉淀具体为用200目筛网过滤所述沉淀。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述缓冲液为磷酸盐缓冲溶液或生理盐水。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述步骤2中,所述离心的具体条件为:4000rpm离心1min。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反复抽吸、吹打所述脂肪组织具体为:用无菌注射器反复抽吸、吹打所述脂肪组织。
10.一种如权利要求1所述的脂肪组织中的血管基质成分在制备抗光老化制剂方面的应用。
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