[发明专利]诱导分化细胞成多潜能内胚层干细胞的方法及其应用有效
| 申请号： | 201910272425.0 | 申请日： | 2019-04-04 |
| 公开（公告）号： | CN111778213B | 公开（公告）日： | 2022-06-28 |
| 发明（设计）人： | 程新;邓小刚;吴佳颖;付天龙 | 申请（专利权）人： | 中国科学院分子细胞科学卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N5/0735;A61K35/545;A61P1/16;A61P1/00;A61P3/10;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人： | 王正君;徐迅 |
| 地址： | 200031 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 诱导 分化 细胞 潜能 胚层 干细胞 方法 及其 应用 | ||
1.一种诱导人类分化细胞分化为诱导多潜能内胚层干细胞（smEnSC）的方法，其特征在于，包括步骤：
(a) 在第一培养条件下，在培养体系中培养分化细胞，从而获得诱导多潜能内胚层干细胞（smEnSC）；其中，所述培养体系包括EGF、A83-01和CHIR99021；
所述分化细胞为Eheps细胞；
所述第一培养条件含有第一培养基；
所述第一培养基选自下组：SFD、DMEM、DMEM/F12、或其组合；
(b)将诱导多潜能内胚层干细胞（smEnSC）分化为内胚层衍生细胞。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述分化为退分化。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养体系还包括选自下组的一种或多种添加物：抗坏血酸磷酸镁（Ascorbic Acid Phosphate Magnesium）、L-谷氨酰胺（L-glutamine）、MTG、bFGF。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述内胚层衍生细胞为肝实质细胞、胆管上皮细胞、小肠上皮细胞或胰岛细胞。
5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，将分化细胞在第一培养条件下培养3-18天。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，将分化细胞在第一培养条件下培养4-16天。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，将分化细胞在第一培养条件下培养6-12天。
8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养体系中不含有或含有很少的细胞外基质。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，在培养体系中，所述细胞外基质的含量（v/v）为0.5%－5%。
10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，在培养体系中，所述细胞外基质的含量（v/v)为1%—3%。
11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，在培养体系中，所述细胞外基质的含量（v/v)为1%－2%。
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