[发明专利]一种快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒及其制备方法在审
申请号: | 201910257726.6 | 申请日: | 2019-04-01 |
公开(公告)号: | CN110133275A | 公开(公告)日: | 2019-08-16 |
发明(设计)人: | 王晓波;朱雪姣;朱海峰 | 申请(专利权)人: | 芜湖森爱驰生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 北京润平知识产权代理有限公司 11283 | 代理人: | 刘兵 |
地址: | 241000 安徽省芜湖市*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 钙卫蛋白 检测试剂 氯化钠 磷酸盐缓冲液 牛血清蛋白 防腐剂 制备 乙二醇聚氧乙烯醚 钙卫蛋白抗体 生物检测技术 表面活性剂 胶乳颗粒 封闭剂 人粪便 包被 灵敏 血液 检测 | ||
本发明涉及生物检测技术领域,具体涉及快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒及其制备方法,所述快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒包括相互独立的试剂R1和试剂R2,其特征在于,所述试剂R1包括:磷酸盐缓冲液50~150mmol/L;氯化钠11~15g/L;表面活性剂3~11g/L;牛血清蛋白5~12g/L;乙二醇聚氧乙烯醚80~100g/L;防腐剂3~6g/L;且所述试剂R1的pH值为6.3~7.5;所述试剂R2包括:磷酸盐缓冲液80~120mmol/L;抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒15~30mg/L;封闭剂20~50mg/L;氯化钠5~8g/L;牛血清蛋白3~8g/L;防腐剂4~6g/L;且所述试剂R2的pH值为7~8,其中,试剂R2中组分浓度为组分在试剂中的终浓度。本发明提供的钙卫蛋白检测试剂盒,能够准备、快速、灵敏的检测出人粪便和血液中的钙卫蛋白。
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域,具体涉及一种快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒及其制备方法。
背景技术
钙卫蛋白是一个分子量为36kD的钙、锌结合蛋白,由两条分子量为14kD的重链和一条分子量为8kD的轻链以共价键连接的钙结合蛋白质异三聚体组成,每条链可结合两个Ca2+,从而具有耐热性和增强水解性的特性。钙卫蛋白是中性粒细胞和活化的巨噬细胞质中重要的蛋白质,在许多炎症情况下含量增加,可作为急性炎症性标志物。
目前虽然钙卫蛋白在人类生物体中多处被发现,包括:血清、唾液、脑脊液和尿液。但在粪便中容易测得,且其成分稳定,室温下可在大便中稳定存在7d左右,且不易被细菌和各种酶类破坏,不受饮食的影响。粪便的钙卫蛋白的检测是一种简单、迅速的、灵敏度高、特异性强、廉价的、非侵袭的炎性肠病检测方法。这种检测方法可以在正常人的黏膜和患病患者的炎性黏膜中都可以获得准确的检测结果。
目前临床上对于钙卫蛋白的检测方法有:酶联免疫法(ELISA)、胶体金法等方法,但这些方法都有各自的特点及不足。ELISA法由于定量准确,广泛应用于医院检验科,但ELISA需要洗板,孵育,加酶和底物对温度环境严格,操作繁琐不能现场检测,测试时间长,不便捷;胶体金法虽然方便、快捷,但由于胶体金颗粒与被标记的蛋白是靠静电作用结合,结合不稳定易受环境的干扰,灵敏度低,无法定量检测;因此,临床上迫切需求建立一种快速、便捷、经济的钙卫蛋白定量检测方法。
发明内容
针对现有技术的不足,本发明的目的是提供一种快速高效的钙卫蛋白检测试剂盒及其制备方法,它具有检测迅速、准确性高的特点。
为实现上述目的,本发明提供一种钙卫蛋白检测试剂盒,包括相互独立的试剂R1和试剂R2,所述试剂R1包括:磷酸盐缓冲液50~150mmol/L;氯化钠11~15g/L;表面活性剂3~11g/L;牛血清蛋白5~12g/L;乙二醇聚氧乙烯醚80~100g/L;防腐剂3~6g/L;且所述试剂R1的pH值为6.3~7.5;
所述试剂R2包括:磷酸盐缓冲液80~120mmol/L;抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒15~30mg/L;封闭剂20~50mg/L;氯化钠5~8g/L;牛血清蛋白3~8g/L;防腐剂4~6g/L;且所述试剂R2的pH值为7~8,其中,试剂R2中组分浓度为组分在试剂中的终浓度。
本发明的发明人在长期研究钙卫蛋白检测试剂盒的基础上发现,通过调整试剂盒试剂中各物质的含量和比例,能够提高试剂盒的灵敏度,并缩短检测时间,优选条件下,所述试剂R1包括:磷酸盐缓冲液80~120mmol/L;氯化钠12~15g/L;表面活性剂5~8g/L;牛血清蛋白6~10g/L;乙二醇聚氧乙烯醚85~96g/L;防腐剂3~6g/L;且所述试剂R1的pH值为6.3~7.5;
优选条件下,所述试剂R2包括:磷酸盐缓冲液90~110mmol/L;抗人钙卫蛋白抗体包被胶乳颗粒18~25mg/L;封闭剂25~45mg/L;氯化钠5~8g/L;牛血清蛋白5~6g/L;防腐剂4~6g/L;且所述试剂R2的pH值为7~8,其中,试剂R2中组分浓度为组分在试剂中的终浓度。
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