[发明专利]细胞分离用微流控芯片及其在肿瘤细胞分离中的应用、细胞分离鉴定方法有效
申请号: | 201910249211.1 | 申请日: | 2019-03-29 |
公开(公告)号: | CN109852544B | 公开(公告)日: | 2023-07-14 |
发明(设计)人: | 欧阳东方 | 申请(专利权)人: | 欧阳东方 |
主分类号: | C12M1/34 | 分类号: | C12M1/34;C12M1/00;C12Q1/02 |
代理公司: | 华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 林青中;潘霞 |
地址: | 518051 广东省深圳市南山*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 分离 用微流控 芯片 及其 肿瘤 中的 应用 鉴定 方法 | ||
本发明涉及一种细胞分离用微流控芯片及其在肿瘤细胞分离中的应用、细胞分离鉴定方法。该微流控芯片包括进液流道、捕获区和出液流道,进液流道具有进液口,进液流道与捕获区的进液侧对应连通,出液流道具有出液口,出液流道与捕获区的出液侧对应连通;捕获区具有多个捕获单元,各捕获单元具有多个分流柱。该微流控芯片采用柱子分选方法,分流柱在捕获区的流道中可以起到分流阻挡的作用,通过分流柱阻挡分别形成捕获流道和通过流道,待捕获的目的细胞可被截留在捕获流道中,而其他非目的细胞可经由通过流道流出,整个微流控芯片结构设计精巧,可用于具有多种不同细胞直径的细胞混合液中目的细胞的分离,分离效果高且操作简单,可广泛推广应用。
技术领域
本发明涉及细胞检测领域,尤其是涉及一种细胞分离用微流控芯片及其在肿瘤细胞分离中的应用、细胞分离鉴定方法。
背景技术
外周血等样本中含有多种细胞,如何从多种细胞中分离得到目的细胞,一直是细胞检测领域的研究热点。例如,如何实现对多样性骨髓瘤这种血液性癌症患者的外周血内存在的循环克隆浆细胞进行有效的分离和精确的计数,对于骨髓瘤的早期临床诊断、预后和治疗都具有重要的意义。传统的实现细胞分离的方法有密度梯度离心法、物理吸附法、细胞电泳法、免疫磁珠法和流式细胞法等,但这些方法普遍存在细胞分离效果不高的问题,尤其是目前也没有一种简单且分离效果好的针对多样性骨髓瘤患者的外周血内的循环克隆浆细胞的分离技术。
发明内容
基于此,有必要提供一种细胞分离用微流控芯片,以解决传统的细胞分离方法存在的分离效果不高的问题。
一种细胞分离用微流控芯片,包括进液流道、捕获区和出液流道,所述进液流道具有进液口,所述进液流道与所述捕获区的进液侧对应连通,所述出液流道具有出液口,所述出液流道与所述捕获区的出液侧对应连通;
所述捕获区具有多个捕获单元,各所述捕获单元具有多个分流柱;各所述捕获单元的多个所述分流柱之间的间隙构成捕获流道和通过流道;从所述捕获区的进液侧至出液侧,一个所述捕获流道经至少一个所述分流柱分成多个所述通过流道。
进一步,还有必要提供一种上述细胞分离用微流控芯片在肿瘤细胞分离过程中的应用。
更进一步,还有必要提供一种使用该细胞分离用微流控芯片的细胞分离鉴定方法。
一种细胞分离鉴定方法,包括如下步骤:
使用上述细胞分离用微流控芯片对细胞样本液进行细胞分离;
使用原位染色的方法对分离后的微流控芯片进行染色;
通过荧光显微镜进行镜检鉴定。
上述细胞分离用微流控芯片采用柱子分选方法,分流柱在捕获区的流道中可以起到分流阻挡的作用,通过分流柱阻挡分别形成捕获流道和通过流道,待捕获的目的细胞可被截留在捕获流道中,而其他非目的细胞可经由通过流道流出,整个微流控芯片结构设计精巧,可用于具有多种不同细胞直径的细胞混合液中目的细胞的分离,分离效果高且操作简单,可广泛推广应用。
附图说明
图1为本发明一实施例的细胞分离用微流控芯片的结构示意图;
图2为图1中预过滤区的局部结构示意图;
图3为图1中出液过滤区的局部结构示意图;
图4为图1中进液流道的靠近捕获区进液侧的局部结构示意图;
图5为图1中捕获区的局部结构示意图;
图6为图5中第一级子捕获区的局部结构示意图;
图7为图6中第一级子捕获单元结构示意图;
图8为图5中第二级子捕获区的局部结构示意图;
图9为图8中第二级子捕获单元结构示意图;
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