[发明专利]重组H9N2禽流感病毒株、其制备方法、禽流感疫苗及其应用有效
| 申请号: | 201910248018.6 | 申请日: | 2019-03-28 |
| 公开(公告)号: | CN109880835B | 公开(公告)日: | 2022-03-25 |
| 发明(设计)人: | 石火英;苏海龙 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
| 主分类号: | C12N15/44 | 分类号: | C12N15/44;C12N7/01;C07K14/11;A61K39/145;A61P31/16 |
| 代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 王艳 |
| 地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 重组 h9n2 禽流感 病毒 制备 方法 疫苗 及其 应用 | ||
1.一种PB2突变型基因,其在H9N2亚型禽流感病毒疫苗株F/98株的PB2基因序列的第554位核苷酸由T突变为A,或其在第1064位核苷酸由G突变为A。
2.一种重组载体,其含有权利要求1所述的PB2突变型基因。
3.一种重组细胞,其含有权利要求1所述的PB2突变型基因或权利要求2所述的重组载体。
4.一种重组病毒,其含有权利要求1所述的PB2突变型基因、权利要求2所述的重组载体或权利要求3所述的重组细胞。
5.权利要求4所述的重组病毒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)通过对H9N2禽流感病毒F/98株的PB2基因进行定点突变,将第554位核苷酸由T突变为A,或将其在第1064位核苷酸由G突变为A 获得PB2突变型基因;
2)将PB2突变型基因插入转录或表达载体中,获得含有PB2突变型基因质粒;
3)将F/98株的7个基因质粒与PB2突变型基因质粒混合,共转染293T细胞获得重组病毒,所述7个基因质粒为pHW202-PB1、pHW203-PA、pHW204-HA、pHW205-NP、pHW206-NA、pHW207-M、pHW208-NS,所述7个基因质粒是在表达载体pHW2000中,分别插入F/98株7个内部基因PB1、PA、HA、NP、M、NS、NA的cDNA形成的7个基因质粒。
6.一种H9N2禽流感病毒疫苗,其特征在于,所述H9N2禽流感病毒疫苗包括免疫量的权利要求4所述的重组病毒。
7.权利要求6所述的H9N2禽流感病毒疫苗在制备预防或治疗H9N2禽流感的药物中的应用。
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